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[交流]
求助 双酶切连接
我们最近做双腿酶切连接，用Nco1和Hind3酶切载体和pcr产物3小时，然后用全式金T4连接酶25度连接15分钟。这里我做了两个，一个只加了酶切载体没加片段，另一个正常加，两者其它条件都一样。转化后涂板，12小时后，只加载体的长了很多 ，而正常加的几乎没长。请问这会是什么原因啊？谢谢大家啊。
双酶切条件应该没问题，前几天我切过，效果很好。 |
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