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纤维素酶与胰蛋白酶的使用问题
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我最近做了个酶催化降解实验：植物细胞粘附在纳米孔氧化铝基片上，考虑它与氧化铝之间粘附是靠纤连蛋白之类的生物分子作用。试用纤维素酶（粉末制成溶液，pH5－6，温度T＝40－50）分解细胞壁纤维素，以便研究在基片上留下的蛋白质组成。结果，冻干后的样品，刀刮后剩下一层绿色细胞壁，就是降解不掉，气死人了。光学显微镜下，看到处理后的基片，残留细胞的绿色是消失了，不过很明显的一大块残留物还在那里（只是颜色变黑了）。难道是铝离子使纤维素酶失活了？ 另外试用胰蛋白酶标准溶液（sigma），把粘附在氧化铝基片上的植物细胞洗脱（40度，pH=7），结果晃了好几天，就是不见脱落。郁闷。是不是铝离子又让胰蛋白酶失活了？ 换用硅片做基体，就能解决以上问题吗？我不是学生物出身。是搞材料的。 烦请各位详解。 |
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