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纤维素酶与胰蛋白酶的使用问题
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我最近做了个酶催化降解实验:植物细胞粘附在纳米孔氧化铝基片上,考虑它与氧化铝之间粘附是靠纤连蛋白之类的生物分子作用。试用纤维素酶(粉末制成溶液,pH5-6,温度T=40-50)分解细胞壁纤维素,以便研究在基片上留下的蛋白质组成。结果,冻干后的样品,刀刮后剩下一层绿色细胞壁,就是降解不掉,气死人了。光学显微镜下,看到处理后的基片,残留细胞的绿色是消失了,不过很明显的一大块残留物还在那里(只是颜色变黑了)。难道是铝离子使纤维素酶失活了? 另外试用胰蛋白酶标准溶液(sigma),把粘附在氧化铝基片上的植物细胞洗脱(40度,pH=7),结果晃了好几天,就是不见脱落。郁闷。是不是铝离子又让胰蛋白酶失活了? 换用硅片做基体,就能解决以上问题吗?我不是学生物出身。是搞材料的。 烦请各位详解。 |
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