| 查看: 2260 | 回复: 4 | |||
[求助]
真核基因的启动子调控区上游如何界定？实验困惑
|
|
请教各位大神： 本人初步做了些启动子方面的研究，但是门外汉，自己摸索的，一知半解。有几个问题，在这里跟大家请教一下： （1）研究基因是从鱼类肝脏中获得的，在活体上其基因表达受细菌（或LPS）诱导，也可被环境污染物抑制表达； （2）通过NCBI上已经公布的该基因的基因组DNA序列信息，向上克隆获得了5‘端上游大约2500bp长度的序列（以ATG为+1计算的），如何知道是否扩到头了呢？这个长度做一般的实验是否足够了呢？ （3）启动子跟所谓的上游调控区应该是两码事吧？我克隆得到的序列，也没预测什么启动子，直接拿软件预测了一下转录因子结合位点。 （4）将获得的2500bp上游序列，构建至双荧光素酶载体上，转染细胞（因为没有该鱼的肝细胞系，采用了鲤鱼EPC细胞），分别进行LPS或环境污染物刺激，但重组质粒的启动子活性均没发生变化，也就是说，跟活体上的基因响应结果不一致？这如何解释呢？应该怎么处理？ 谢谢😊 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 虫友问答-分子生物 |
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有175人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
我欲乘风归去
木虫 (正式写手)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 3280.1
- 散金: 1055
- 红花: 26
- 帖子: 841
- 在线: 878.8小时
- 虫号: 3340869
- 注册: 2014-07-27
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
2楼2018-03-17 04:53:27
3楼2018-04-10 14:51:07
 |
4楼2019-12-12 20:25:50
5楼2023-06-12 12:50:22
100