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Ivy尘

新虫 (正式写手)

[交流] 求教!!!观察gfp标记转基因烟草

构建了带GFP的双元表达载体(潮霉素抗性),用发根农杆菌转烟草,筛选了抗潮霉素的毛状根,用倒置荧光显微镜观察荧光。直接看根,有明显荧光,但是压片冲水后荧光就非常弱了,而且未转基因的烟草根也有轻微荧光。怀疑看到的绿色的荧光感觉是化合物的荧光。
请问倒置荧光显微镜观察烟草是有背景荧光吗?正确的图应该是什么样的,有必要冰冻切片(10微米)在激光共聚焦下面看吗?
图1-3都是未压片、转基因的毛状根,压片后的太弱了拍不好,空白的烟草根的纤维或者中柱也有绿色荧光,只是稍微淡一点。


求教!!!观察gfp标记转基因烟草


求教!!!观察gfp标记转基因烟草-1


求教!!!观察gfp标记转基因烟草-2


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Ivy尘

新虫 (正式写手)

2楼2018-03-16 01:28:34
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Ivy尘

新虫 (正式写手)

3楼2018-03-16 13:49:07
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Ivy尘

新虫 (正式写手)

来……个……人……啊……难道我发错方向了吗

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4楼2018-03-16 16:01:17
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SunRuikang

新虫 (小有名气)

你好,gfp农杆菌能给我一点吗?

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5楼2018-03-17 22:22:43
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Ivy尘

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by SunRuikang at 2018-03-17 22:22:43
你好,gfp农杆菌能给我一点吗?

农杆菌可以,我们是发根农杆菌。问题是载体不知道是不是能用的,做了很久表达荧光都有问题,你知道我图里的光是化合物背景还是真的gfp荧光吗

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6楼2018-03-18 00:02:26
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SunRuikang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Ivy尘 at 2018-03-18 00:02:26
农杆菌可以,我们是发根农杆菌。问题是载体不知道是不是能用的,做了很久表达荧光都有问题,你知道我图里的光是化合物背景还是真的gfp荧光吗
...

不好意思这个我不知道。你什么时候方便给我一份?如果方便的话烟草也麻烦来一份。谢谢啦。

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7楼2018-03-18 12:34:48
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8楼2018-03-18 13:29:37
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SunRuikang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Ivy尘 at 2018-03-18 00:02:26
农杆菌可以,我们是发根农杆菌。问题是载体不知道是不是能用的,做了很久表达荧光都有问题,你知道我图里的光是化合物背景还是真的gfp荧光吗
...

快递方便吗?

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9楼2018-03-18 13:43:06
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Ivy尘

新虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by SunRuikang at 2018-03-18 13:43:06
快递方便吗?
...

私信地址吧

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10楼2018-03-19 06:24:48
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