24小时热门版块排行榜    

查看: 792  |  回复: 5
当前主题已经存档。

yuq

金虫 (正式写手)

[交流] HPLC 标准曲线不能定量

前天用几种物质做了个混标浓度梯度标准曲线,线性很好,有4个9,但是当用里面的一种物质配了个浓度来验证时发现,计算出来的浓度是已知浓度的3倍,这到底是怎么回事啊?我的浓度绝对没有配错,我那个单标又重新配了好几次来测,计算出来的就是不是我配的浓度,数据是waters自己处理的,没有人为误差。

另外还有个问题:我的混标中,其他几种物质在同一浓度下峰都差不多高,而有一种却是峰很低,更奇怪的是它随着浓度的增加,反而峰越来越小,这是怎么回事?是不是还是说明我的混标配的有问题啊?

最后我的混标峰中,有些物质分的不是很开,是不是对于计算峰面积也有影响啊?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ly2199

专家顾问 (正式写手)

★ ★ ★
佳怡(金币+3,VIP+0):感谢参与讨论 3-17 08:55
我觉得有以下几种可能:
1.你说你的混标有的分得不是很开,对于标样来说,一定要保证各个物质打到基线分离,否则你的峰面积就不会很准的,这很可能是你后来计算不准确的主要原因
2.还有你在进样时是否用的是定量环呢,还是自动进样,如果是这两种情况的话,应该说进样方面的误差会小一些,否则纯粹手动进样的话,有可能会带来误差,
2楼2009-03-14 10:15:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuq

金虫 (正式写手)

大家觉得这样的解释怎么样?

【用的是waters empower软件,可能的原因是你建立处理方法时,在选择线性的哪一步选择了默认的“线性”计算方式,如果选择默认的“线性”方式,可能会出现浓度高于正常、正常、低于正常三种情况。我也是最近才遇见的。要解决其实很简单,在选择线性哪一步,选择“线性过原点”方式,就不会出现浓度大3倍的情况。】
3楼2009-03-14 19:16:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panshi3000

金虫 (小有名气)

★ ★
佳怡(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论 3-17 08:55
同意上述言论.但有一点小问题,无论是混标,还是测其中一种物质,你的检测波长都要一定(举个例子,检测器不同,道理一样),因为不同波长的吸光系数是不同的.三倍浓度可能是这原因.
4楼2009-03-16 02:08:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sjq10

铜虫 (初入文坛)

吸收波长都保证是一样就是了   对最后结果应该没有影响吧 !只是 最大吸收而已  是不是灵敏度而已
小木虫让我们更多的人为了知识而团聚,相信这里给你提供更多的资料和解答疑问的机会
5楼2009-03-16 10:29:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sjq10

铜虫 (初入文坛)


佳怡(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论 3-17 08:56
吸收波长都保证是一样就是了   对最后结果应该没有影响吧 !只是 最大吸收而已   ,灵敏度不高而已
小木虫让我们更多的人为了知识而团聚,相信这里给你提供更多的资料和解答疑问的机会
6楼2009-03-16 10:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuq 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:41 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 04:21 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见