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x8m8q8

新虫 (小有名气)

[求助] 目的基因与质粒经过酶切连接后,怎么确定连接上了? 已有3人参与

目的基因与质粒经过酶切连接后,怎么确定连接上了?
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daijianhui

新虫 (初入文坛)

最简单办法就是跑胶,看下片段范围
2楼2018-03-15 15:30:23
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705369449

银虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-03-16 07:52:36
转化,涂平板,挑菌PCR,摇菌,测序。

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-03-15 15:32:38
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x8m8q8

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by daijianhui at 2018-03-15 15:30:23
最简单办法就是跑胶,看下片段范围

那这个片段范围就是目的基因大小与质粒大小之和吧?
4楼2018-03-15 15:39:40
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)

不行啊。转化,挑菌,测序就行

发自小木虫Android客户端
17343151072目前在一道生物,常联系
5楼2018-03-15 16:15:13
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zyfskj

新虫 (著名写手)

向我乞求怜悯吧,我会狠狠拒绝的。
6楼2018-03-15 17:29:07
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
转化涂抗生素选择性培养板,首先要能长出单克隆。
验证方法:1.菌落pcr;2.单酶切跑电泳;3.送菌液或质粒测序
最终都是要通过测序验证,所以1/2可省略,直接3。
2019更好更棒!
7楼2018-03-15 20:10:15
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whxuan

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

最后还得看表达目的蛋白或构建菌株表达水平,还得把菌筛选出来
8楼2018-03-22 15:25:19
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悦悦饼饼

新虫 (小有名气)

转化,挑斑,摇菌,菌P,酶切检测,测序

发自小木虫Android客户端
9楼2018-03-22 16:20:49
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王查查23

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

10楼2018-03-23 07:56:28
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