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lwq652

木虫 (正式写手)

[交流] CTAB法提取DNA疑惑

前几天提取DNA,参照的CTAB法,但是做了即便都没有成功,因为离心时,离心管中的绿色的絮状物总是不能离下去,而是聚集在液面上,起先以为是温度过低,后来离心温度设到25度,还是不行。不知道原因处在哪里?恳请赐教,谢谢!!
我提取的DNA量比较多,所以用的是10mL的离心管
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一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
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zl382

铁虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):辛苦,~ 3-12 20:41
研磨的不好吧
那个离心要低温离心的。
后退,绝对是无路可走!
2楼2009-03-12 18:48:01
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

我也遇到了和你一样的问题,一直没能很好的解决,离不下去就那样抽上吧,第二次抽提的时候尽量避免抽到杂质,这可能是物种差异吧,我做的植物当中有的就比较好
3楼2009-03-12 21:50:53
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lwq652

木虫 (正式写手)

回复zl382
我们磨得都很细啊 !!!至于温度 ,CTAB不是不能低温的吗?不然就会被析出了
一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
4楼2009-03-13 08:01:45
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lwq652

木虫 (正式写手)

回复欣晴5832  
不行啊,那是厚厚的一层聚集在液面,tip头插下去时,就进去了啊
一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
5楼2009-03-13 08:03:46
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

对,我们第一次抽提时没有办法把这些也抽上去了,第二次抽提后的上清里面有很多蛋白,有很多最后就抽不了了,最后DNA的得率就很低。你抽提时用酚了吗
6楼2009-03-13 13:25:48
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lwq652

木虫 (正式写手)

用了,酚氯仿异戊醇25:24:1
一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
7楼2009-03-13 20:23:34
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