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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » CTAB法提取DNA疑惑
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lwq652

木虫 (正式写手)

[交流] CTAB法提取DNA疑惑

前几天提取DNA，参照的CTAB法，但是做了即便都没有成功，因为离心时，离心管中的绿色的絮状物总是不能离下去，而是聚集在液面上，起先以为是温度过低，后来离心温度设到25度，还是不行。不知道原因处在哪里？恳请赐教，谢谢！！
我提取的DNA量比较多，所以用的是10mL的离心管
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1楼 2009-03-12 18:05:03
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zl382

铁虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):辛苦,~ 3-12 20:41
研磨的不好吧
那个离心要低温离心的。
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后退，绝对是无路可走！
2楼2009-03-12 18:48:01
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
我也遇到了和你一样的问题，一直没能很好的解决，离不下去就那样抽上吧，第二次抽提的时候尽量避免抽到杂质，这可能是物种差异吧，我做的植物当中有的就比较好
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3楼2009-03-12 21:50:53
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lwq652

木虫 (正式写手)
回复zl382
我们磨得都很细啊 ！！！至于温度 ，CTAB不是不能低温的吗？不然就会被析出了
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一念错，便觉百行皆非，防之当如渡海浮囊，勿容一针之罅漏
4楼2009-03-13 08:01:45
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lwq652

木虫 (正式写手)
回复欣晴5832  
不行啊，那是厚厚的一层聚集在液面，tip头插下去时，就进去了啊
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一念错，便觉百行皆非，防之当如渡海浮囊，勿容一针之罅漏
5楼2009-03-13 08:03:46
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
对，我们第一次抽提时没有办法把这些也抽上去了，第二次抽提后的上清里面有很多蛋白，有很多最后就抽不了了，最后DNA的得率就很低。你抽提时用酚了吗
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6楼2009-03-13 13:25:48
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lwq652

木虫 (正式写手)
用了，酚氯仿异戊醇25：24：1
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7楼2009-03-13 20:23:34
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