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悟天-小木

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 生化反应-酶活实验已有1人参与

关于一个染色质重塑的酶，它依赖水解ATP催化组蛋白变体替换一般核小体中的常规组蛋白，由于核小体中每一种组蛋白有两份，所以该催化反应分两步依次进行。不幸地是，我在实验中，它只能进行一步催化反应，不管怎么改变底物比例还是延长催化时间都不能完成第二步反应。请熟悉做生化反应的朋友们，帮我分析分析这处酶促反应不能正常工作的的可能原因。谢谢各位

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1楼 2018-03-08 19:42:11

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成熟质

禁虫 (正式写手)

★
感谢参与，应助指数 +1
悟天-小木: 金币+1, ★有帮助, 感谢你的建议 2018-03-09 14:58:31

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2楼2018-03-09 09:11:05

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悟天-小木

铜虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by 成熟质 at 2018-03-09 09:11:05
1、酶生化作用研究是很好的研究大方向。从上述内容看，可能是酶密度比例或实验中水解时水温或实验中水解时其它可能氧化物的影响或者常规组蛋白中蛋白本身质量问题。
2、所有的H1被除去后也不会影响到核小体的结构 ...

在几十次的反复实验中，酶浓度梯度已经试验过，依然不能完成第二步催化反应，温度仪器准确控制，缓冲液中有抑制剂防止氧化，常规核小体已重新组装多次。不幸地是，并不能解决问题。