应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RT-PCR
51/1返回列表
查看: 655  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

虫子739

铁虫 (小有名气)

[交流] RT-PCR

RT-PCR需要获得1500bp左右的片段，可是我做了几次反转录都没出现目的条带。用内参引物做的RT-PCR，条带与理论相符合。是因为目的条带太大？还是目的基因的转录水平太低？PCR的条件是不是要很特殊，希望有经验的同仁指点迷津！谢谢！~
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-03-11 16:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sail000000

铜虫 (小有名气)
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论,欢迎常来~ 3-14 01:00
引用回帖:
Originally posted by 虫子739 at 2009-3-11 16:19:
RT-PCR需要获得1500bp左右的片段，可是我做了几次反转录都没出现目的条带。用内参引物做的RT-PCR，条带与理论相符合。是因为目的条带太大？还是目的基因的转录水平太低？

做内参能做出来说明你的模板是没问题的，目的条带不出来可能是你的体系、程序没找对，还有可能是表达量太低。
你做的如果是别人做过的已知基因，你可以看看别人文献里有没有做表达分析的，看看你的基因有没有基础表达，如果是诱导才表达、生长的某一个时段才表达的话，你就要找准采样的时间了！
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2009-03-14 00:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):应该是这样 3-11 17:35
RT检测表达量无需扩这么长，不超过500bp
赞一下(6人) 回复此楼
2楼2009-03-11 16:28:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亦木水

铜虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):辛苦,欢迎常来~ 3-14 00:59
我现在遇到同样的问题，我的目的条带是2.5kb的，已经做了快一个月了
可以检查RNA的纯度
把RT-PCR第一步逆转录所得cDNA电泳，看是否有结果
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2009-03-12 00:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子739

铁虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):鼓励新虫~ 3-14 00:59
cDNA电泳回出现条带吗？要是那样能出来了，我们不就可以不作PCR了？直接做RT就好了。
你那样电泳有结果吗？
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2009-03-13 18:14:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291 求调剂 +7 化工2026届毕业� 2026-03-21 8/400 2026-03-26 11:25 by AlenQIN.
[考研] 274求调剂 +11 顾九笙要谦虚 2026-03-24 16/800 2026-03-26 09:55 by stone_128
[考研] 材料调剂 5+3 想要一壶桃花水 2026-03-25 8/400 2026-03-26 09:51 by 王小欠i
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 各位老师您好：本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 352求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123！
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭