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joker_jane

新虫 (初入文坛)

[交流] 新人求助!孢子悬液过滤有很多杂质怎么办 已有4人参与

向各位大佬求助,以前没做过这方面。刚开始做真菌。
丝状真菌制备孢子悬液,感觉孢子很难收集,洗不下来,把菌丝刮下来成了一团,孢子洗不出来。
用6层纱布过滤,在显微镜下还是有很多菌丝之类的杂质。
请问怎么才能收集到高浓度的孢子悬液呀。
谢谢大佬们!!

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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
silicare: 金币+10, MicEPI+1, 应助指数+1, 欢迎回归 2018-03-10 08:56:49
你在短信里提到孢子量太低,在帖子里提到制备孢子液的时候会不可避免地带入菌丝,我觉得使孢子的量增加是有效的方法,因为在绝对的优势面前,菌丝的影响可以忽略不计。你的菌我没有做过,我凭经验回复,供参考(附上的文章里的培养基你可以试试,是不是合适得试过才知道)。

1.不同的真菌产孢子的量会有不同,这是其中的一个因素,例如用过好几种培养基,草酸青霉的产孢子的量都比嗜松篮状菌丰富。如果你的菌属于产孢子的量很少的,那么往下看第2点。
Identification and characterization of an acidic and acid-stable endoxyloglucanase from Penicillium oxalicum
作者: Xian, Liang; Wang, Fei; Yin, Xin; 等.
INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES  卷: 86   页: 512-518   出版年: MAY 2016

2.同一菌株在不同的培养基上产孢子的量不同,例如小麦曲霉在PDA上菌落疏松产孢子的量较少,在麦麸培养基上菌丝高大疏松产孢子的量少,但在文章里的这个培养基上菌落致密产孢子的量丰富。
Purification and biochemical characterization of a novel mesophilic glucoamylase from Aspergillus tritici WZ99
作者: Xian, Liang; Feng, Jia-Xun
INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES  卷: 107   页: 1122-1130   子辑: A   出版年: FEB 2018

3.由于菌落之间相互接触,会改变菌丝的生长状态,会对产孢子的量有影响,例如嗜松篮状菌的菌落密度大时产孢子的量会丰富,单个菌落时菌丝肆意生长,造成只有中心区域产孢子较多。办法是使一块直径为9厘米的平板上生长100个菌落,形成菌苔。
Purification and Characterization of a Highly Efficient Calcium-Independent alpha-Amylase from Talaromyces pinophilus 1-95
作者: Xian, Liang; Wang, Fei; Luo, Xiang; 等.
PLOS ONE  卷: 10   期: 3     文献号: e0121531   出版年: MAR 26 2015
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2018-03-04 22:39:43
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zyfskj

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
注射器塞1ml棉花,塞紧实,灭菌,烘干,过滤孢子悬浮液

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向我乞求怜悯吧,我会狠狠拒绝的。
2楼2018-03-03 15:36:56
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joker_jane

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zyfskj at 2018-03-03 15:36:56
注射器塞1ml棉花,塞紧实,灭菌,烘干,过滤孢子悬浮液

谢谢回复!请问浓度低怎么办呢 我看都说把孢子刮下来,用灭菌水洗平板,但是一刮菌丝就成一团了,感觉孢子不能充分洗出来

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3楼2018-03-03 15:45:29
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joker_jane

新虫 (初入文坛)

求助试过n种方式,都没有理想的浓度,还是太低

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4楼2018-03-03 18:14:24
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