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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 新人求助！孢子悬液过滤有很多杂质怎么办
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joker_jane

新虫 (初入文坛)

[交流] 新人求助！孢子悬液过滤有很多杂质怎么办 已有4人参与

向各位大佬求助，以前没做过这方面。刚开始做真菌。
丝状真菌制备孢子悬液，感觉孢子很难收集，洗不下来，把菌丝刮下来成了一团，孢子洗不出来。
用6层纱布过滤，在显微镜下还是有很多菌丝之类的杂质。
请问怎么才能收集到高浓度的孢子悬液呀。
谢谢大佬们！！

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1楼 2018-03-03 15:33:04
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
silicare: 金币+10, MicEPI+1, 应助指数+1, 欢迎回归 2018-03-10 08:56:49
你在短信里提到孢子量太低，在帖子里提到制备孢子液的时候会不可避免地带入菌丝，我觉得使孢子的量增加是有效的方法，因为在绝对的优势面前，菌丝的影响可以忽略不计。你的菌我没有做过，我凭经验回复，供参考（附上的文章里的培养基你可以试试，是不是合适得试过才知道）。

1.不同的真菌产孢子的量会有不同，这是其中的一个因素，例如用过好几种培养基，草酸青霉的产孢子的量都比嗜松篮状菌丰富。如果你的菌属于产孢子的量很少的，那么往下看第2点。
Identification and characterization of an acidic and acid-stable endoxyloglucanase from Penicillium oxalicum
作者: Xian, Liang; Wang, Fei; Yin, Xin; 等.
INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES  卷: 86   页: 512-518   出版年: MAY 2016

2.同一菌株在不同的培养基上产孢子的量不同，例如小麦曲霉在PDA上菌落疏松产孢子的量较少，在麦麸培养基上菌丝高大疏松产孢子的量少，但在文章里的这个培养基上菌落致密产孢子的量丰富。
Purification and biochemical characterization of a novel mesophilic glucoamylase from Aspergillus tritici WZ99
作者: Xian, Liang; Feng, Jia-Xun
INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES  卷: 107   页: 1122-1130   子辑: A   出版年: FEB 2018

3.由于菌落之间相互接触，会改变菌丝的生长状态，会对产孢子的量有影响，例如嗜松篮状菌的菌落密度大时产孢子的量会丰富，单个菌落时菌丝肆意生长，造成只有中心区域产孢子较多。办法是使一块直径为9厘米的平板上生长100个菌落，形成菌苔。
Purification and Characterization of a Highly Efficient Calcium-Independent alpha-Amylase from Talaromyces pinophilus 1-95
作者: Xian, Liang; Wang, Fei; Luo, Xiang; 等.
PLOS ONE  卷: 10   期: 3     文献号: e0121531   出版年: MAR 26 2015
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2018-03-04 22:39:43
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zyfskj

新虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
注射器塞1ml棉花，塞紧实，灭菌，烘干，过滤孢子悬浮液

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向我乞求怜悯吧，我会狠狠拒绝的。
2楼2018-03-03 15:36:56
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joker_jane

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zyfskj at 2018-03-03 15:36:56
注射器塞1ml棉花，塞紧实，灭菌，烘干，过滤孢子悬浮液

谢谢回复！请问浓度低怎么办呢 我看都说把孢子刮下来，用灭菌水洗平板，但是一刮菌丝就成一团了，感觉孢子不能充分洗出来

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3楼2018-03-03 15:45:29
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joker_jane

新虫 (初入文坛)
求助试过n种方式，都没有理想的浓度，还是太低

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4楼2018-03-03 18:14:24
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myindexaust

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用无菌水振荡洗斜面

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5楼2018-03-03 21:37:42
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joker_jane

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by myindexaust at 2018-03-03 21:37:42
用无菌水振荡洗斜面

谢谢，我试一试

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6楼2018-03-04 16:06:45
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zhengXN

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一根斜面达不行就用两根，无菌水用少点，还可以发酵培养菌的孢子
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8楼2018-06-11 08:13:35
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