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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » 淋巴细胞体外刺激物的选择
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ccs411

木虫 (正式写手)

[求助] 淋巴细胞体外刺激物的选择 已有2人参与

请教：抗原蛋白免疫小鼠后，分离淋巴细胞，在体外使用的刺激物，大多选择多肽，而不是抗原本身，为什么？
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1楼 2018-02-24 12:23:57
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jordanness

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个要看你的目的了吧，如果仅仅需要生产针对蛋白质某个区域的特异抗体，比如研究蛋白质N端的前提物，我们就需要设计N末端的多肽抗原。如果抗体的使用目的是识别修饰的氨基酸，如磷酸化的丝氨酸、苏氨酸或者酪氨酸，乙酰化赖氨酸等，就必须对多肽进行相应的修饰。如果抗体最终用来识别自然状态下的蛋白质，对抗原的设计就要求更高。
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2楼2018-02-24 13:29:35
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ccs411

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jordanness at 2018-02-24 13:29:35
这个要看你的目的了吧，如果仅仅需要生产针对蛋白质某个区域的特异抗体，比如研究蛋白质N端的前提物，我们就需要设计N末端的多肽抗原。如果抗体的使用目的是识别修饰的氨基酸，如磷酸化的丝氨酸、苏氨酸或者酪氨酸， ...

首先，感谢您的回复。
可能我的问题说的不够清楚，我再补充说明一下：
蛋白类疫苗，在进行效力检测时，先进行小鼠免疫，之后分离小鼠的淋巴细胞，使用elispot方法，在体外加入多肽进行刺激，检测免疫的效果。在这里，免疫动物时，使用的抗原是蛋白，而在体外刺激淋巴细胞时，抗原大多选择相应蛋白的多肽，却不是蛋白本身，为什么？
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3楼2018-02-24 15:07:13
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mzfcdf

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ccs411 at 2018-02-24 15:07:13
首先，感谢您的回复。
可能我的问题说的不够清楚，我再补充说明一下：
蛋白类疫苗，在进行效力检测时，先进行小鼠免疫，之后分离小鼠的淋巴细胞，使用elispot方法，在体外加入多肽进行刺激，检测免疫的效果。在这 ...

因为蛋白纯化过程复杂，且lps不易去除，所以合成多肽是经济快速方便，但多肽的刺激并不能真实反应蛋白的刺激情况，所以严格的审稿者可能不会接受使用多肽的刺激。

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4楼2018-08-26 08:42:02
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xbburton

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这是因为抗原蛋白免疫小鼠后，真正在小鼠体内刺激免疫反应的是经小鼠体内细胞（APC）降解抗原蛋白而产生的多肽（抗原肽）；在体外则没有相应的机制来降解抗原蛋白，需要用多肽来直接刺激啊。
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5楼2018-10-06 08:33:27
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xbburton

至尊木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mzfcdf at 2018-08-26 08:42:02
因为蛋白纯化过程复杂，且lps不易去除，所以合成多肽是经济快速方便，但多肽的刺激并不能真实反应蛋白的刺激情况，所以严格的审稿者可能不会接受使用多肽的刺激。
...

严格的审稿者应该明白这一免疫学知识的，否则只能呵呵了
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6楼2018-10-06 08:37:46
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mzfcdf

木虫 (正式写手)
ewt 的，-2，08！）87？“可以拿哪方面呢，9 @

发自小木虫IOS客户端
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7楼2019-03-02 08:17:39
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