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ccs411

木虫 (正式写手)

[求助] 淋巴细胞体外刺激物的选择 已有2人参与

请教:抗原蛋白免疫小鼠后,分离淋巴细胞,在体外使用的刺激物,大多选择多肽,而不是抗原本身,为什么?
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jordanness

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个要看你的目的了吧,如果仅仅需要生产针对蛋白质某个区域的特异抗体,比如研究蛋白质N端的前提物,我们就需要设计N末端的多肽抗原。如果抗体的使用目的是识别修饰的氨基酸,如磷酸化的丝氨酸、苏氨酸或者酪氨酸,乙酰化赖氨酸等,就必须对多肽进行相应的修饰。如果抗体最终用来识别自然状态下的蛋白质,对抗原的设计就要求更高。
2楼2018-02-24 13:29:35
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ccs411

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jordanness at 2018-02-24 13:29:35
这个要看你的目的了吧,如果仅仅需要生产针对蛋白质某个区域的特异抗体,比如研究蛋白质N端的前提物,我们就需要设计N末端的多肽抗原。如果抗体的使用目的是识别修饰的氨基酸,如磷酸化的丝氨酸、苏氨酸或者酪氨酸, ...

首先,感谢您的回复。
可能我的问题说的不够清楚,我再补充说明一下:
蛋白类疫苗,在进行效力检测时,先进行小鼠免疫,之后分离小鼠的淋巴细胞,使用elispot方法,在体外加入多肽进行刺激,检测免疫的效果。在这里,免疫动物时,使用的抗原是蛋白,而在体外刺激淋巴细胞时,抗原大多选择相应蛋白的多肽,却不是蛋白本身,为什么?
3楼2018-02-24 15:07:13
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mzfcdf

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ccs411 at 2018-02-24 15:07:13
首先,感谢您的回复。
可能我的问题说的不够清楚,我再补充说明一下:
蛋白类疫苗,在进行效力检测时,先进行小鼠免疫,之后分离小鼠的淋巴细胞,使用elispot方法,在体外加入多肽进行刺激,检测免疫的效果。在这 ...

因为蛋白纯化过程复杂,且lps不易去除,所以合成多肽是经济快速方便,但多肽的刺激并不能真实反应蛋白的刺激情况,所以严格的审稿者可能不会接受使用多肽的刺激。

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-08-26 08:42:02
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xbburton

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这是因为抗原蛋白免疫小鼠后,真正在小鼠体内刺激免疫反应的是经小鼠体内细胞(APC)降解抗原蛋白而产生的多肽(抗原肽);在体外则没有相应的机制来降解抗原蛋白,需要用多肽来直接刺激啊。
5楼2018-10-06 08:33:27
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xbburton

至尊木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by mzfcdf at 2018-08-26 08:42:02
因为蛋白纯化过程复杂,且lps不易去除,所以合成多肽是经济快速方便,但多肽的刺激并不能真实反应蛋白的刺激情况,所以严格的审稿者可能不会接受使用多肽的刺激。
...

严格的审稿者应该明白这一免疫学知识的,否则只能呵呵了
6楼2018-10-06 08:37:46
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mzfcdf

木虫 (正式写手)

ewt 的,-2,08!)87?“可以拿哪方面呢,9 @

发自小木虫IOS客户端
7楼2019-03-02 08:17:39
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