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duzhibing

木虫 (小有名气)

[交流] 求教降落PCR程序的设定

我的实验需要用降落PCR程序进行扩增,但是我不会设定降落PCR程序,哪位高手可以把程序设定步骤说一下,不胜感激。我们实验室的PCR仪是Biometra的。
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ghx2005

铜虫 (初入文坛)

每个循环降0.5度?
不需要这么精细吧,我做实验一般是隔2个循环温度降2度,最后在55度做25个循环,效果很好
6楼2009-03-09 09:15:40
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查看全部 7 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

看说明书嘛………………
没有说明书就上官网找
再不行找销售帮你找……
2楼2009-03-08 16:59:11
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

降落pcr的程序不是固定的,是根据实验的需要设定的吧,你还是多参考一下相关的文章
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-03-08 18:29:17
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your2007

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
duzhibing(金币+10,VIP+0):谢谢,有两个答案,所以每人10个了,非常感谢! 3-9 09:59
引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2009-3-8 18:29:
降落pcr的程序不是固定的,是根据实验的需要设定的吧,你还是多参考一下相关的文章

同样楼上,其实在普通PCR仪上设置降落pcr的程序很简单,只要常规的PCR程序会设计,这就好办,首先根据引物上的Tm值设计第一轮的程序,当然,要选引物所给Tm值低的那个,然后在循环4轮,每轮降1度,在PCR仪上多摸索几次,最后就是设计普通PCR的程序了,比如:
1、95度   5分钟
2、94度    50秒
3、60度   45秒       +(这个加号应该在PCR仪上显示)
4、72度   2分钟     2      5

5、94度    50秒
6、55度   45秒
7、72度   2分钟     5      25
8、72度  10分钟
9、16度   X分钟

[ Last edited by your2007 on 2009-3-8 at 19:31 ]
爱人者被爱,敬人者人敬
4楼2009-03-08 19:29:25
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