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duzhibing木虫 (小有名气)
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[交流]
求教降落PCR程序的设定
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| 我的实验需要用降落PCR程序进行扩增，但是我不会设定降落PCR程序，哪位高手可以把程序设定步骤说一下，不胜感激。我们实验室的PCR仪是Biometra的。 |
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6楼2009-03-09 09:15:40
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duzhibing(金币+10,VIP+0):谢谢，有两个答案，所以每人10个了，非常感谢！ 3-9 09:59
duzhibing(金币+10,VIP+0):谢谢，有两个答案，所以每人10个了，非常感谢！ 3-9 09:59
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同样楼上，其实在普通PCR仪上设置降落pcr的程序很简单，只要常规的PCR程序会设计，这就好办，首先根据引物上的Tm值设计第一轮的程序，当然，要选引物所给Tm值低的那个，然后在循环4轮，每轮降1度，在PCR仪上多摸索几次，最后就是设计普通PCR的程序了，比如： 1、95度 5分钟 2、94度 50秒 3、60度 45秒 +（这个加号应该在PCR仪上显示） 4、72度 2分钟 2 5 5、94度 50秒 6、55度 45秒 7、72度 2分钟 5 25 8、72度 10分钟 9、16度 X分钟 [ Last edited by your2007 on 2009-3-8 at 19:31 ] |
4楼2009-03-08 19:29:25