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关于大肠工程菌能否表达的问题？
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| 当我们将某段酶的序列插入到质粒载体中，再转化大肠表达的时候，关于酶无法表达涉及到哪些方面？启动子？信号肽？酶基因序列本身？生长环境？ |
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2楼2018-02-07 21:57:15
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4楼2018-02-10 09:56:45
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如果转化没问题，也可能是诱导条件的问题 发自小木虫Android客户端 |
5楼2018-02-10 11:27:28
kj3654023
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序列要正确，可以试试TEF启动子 发自小木虫Android客户端 |
6楼2018-02-14 16:07:38
丶简简单单
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-02-24 08:01:59
| 你分析的这几点都有可能。建议楼主可以从密码子优化、信号肽切除、使用原核启动子、更换宿主菌、优化表达条件等着手。还建议楼主查阅相关酶的文献，其是否是毒性蛋白。这个网站整理的内容挺详细的，建议看一下。http://www.detaibio.com/topics/yuan-he-biao-da-faq.html |
7楼2018-02-23 10:22:06
dellxiong
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13楼2018-04-09 09:54:55
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怎么就能确定没有表达呢，可能是表达量低，大肠杆菌表达包涵体是很常见的问题。如果带走标签的话，可以做个wb看看是不是有表达，只是普通蛋白胶看不出来。或者说，要是菌诱导后长不起来，那可能是蛋白有毒性。 发自小木虫Android客户端 |
14楼2018-04-17 17:06:49
17楼2018-07-06 17:32:47
happymxh
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