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tz607222

铁虫 (小有名气)

[求助] 大孔树脂纯化黄酮含量的问题 已有3人参与

本人刚刚接触天然药物的分离纯化,想用大孔树脂最佳醇浓度洗下含量最高的黄酮那部分作为药理模型的使用药物。我将荨麻浸膏用少量水超声溶解后,配成6mg/ml的浓度上样。开始水洗体积为7BV,上样流速为4ml/ml,醇洗脱体积为5BV、洗脱流速4ml/min。收集纯化后的流出液,经浓缩、减压干燥后,以紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量。问题来了!我水洗完后,以芦丁味标准品,测定水洗部分的黄酮含量为2%,接着用15%乙醇继续洗脱,测得这部分黄酮含量为31%;再用30%醇洗脱,含量为39.25%;50%乙醇洗脱,黄酮含量为30.52%。这个结果和我师姐做过的50%醇洗脱的黄酮含量能达到52%完全版不相符啊,15%醇和30%醇洗的黄酮怎么比50%的还多的呢???这点哪位大神请给我解释以下,是我师姐的结果不对,还是我上柱子上的有问题呢?@lifeliuyan
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wang422jian

新虫 (正式写手)

你把你所有的洗脱下来的黄酮含量加一块,已超过100%.不知是你计算的问题还是其他什么原因

发自小木虫Android客户端
3楼2018-02-09 08:07:19
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渣渣秦

新虫 (初入文坛)

2楼2018-02-08 08:34:07
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tz607222

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wang422jian at 2018-02-09 08:07:19
你把你所有的洗脱下来的黄酮含量加一块,已超过100%.不知是你计算的问题还是其他什么原因

什么意思?为什么加一块?我得意思是想找出能洗出黄酮含量最高的那部分所对应的醇浓度,每个醇浓度洗下的部分旋蒸后测的这部分含量,得出的百分比。就是想得到百分比最高的那部分

发自小木虫Android客户端
4楼2018-02-11 19:27:32
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czzlnkar

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

问题出在几个方面:
1是算错了,比如定容的容量瓶记错了或者吸光度记错数了等等非操作手法问题……2是你师姐那部分提取不完全不知道回收率是不是已经过了……3是你用的药材和她的不是一批造成含量不同……4是本身此方法重现性差,过柱子的时候手法因人而异或乙醇没被水洗干净等等造成做定量本身就比较不易重现

发自小木虫IOS客户端
5楼2018-02-11 23:02:04
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