应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求高手帮助设计引物 散30金币
汕头大学海洋科学接受调剂
251/3返回列表123下一页
查看: 911  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 yghboy168 的 9 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会

yghboy168

银虫 (小有名气)

[交流] 求高手帮助设计引物 散30金币

本基因是链霉菌NRPS基因簇中小片段基因。上引中，加入NdeI酶切位点，下引加入Xbal meixie 位点。

      1 GTGAGTGAGA GCCGCTGTGC CGGGCAGGGC CTGGTGGGGG CACTGCGGAC CTGGGCACGG
     61 ACACGTGCCC GGGAGACTGC CGTGGTTCTC GTACGGGACA CCGGAACCAC CGACGACACG
    121 GCGTCGGTGG ACTACGGACA GCTGGACGAG TGGGCCAGAA GCATCGCGGT GACCCTCCGA
    181 CAGCAACTCG CGCCGGGGGG ACGGGCACTT CTGCTGCTGC CGTCCGGCCC GGAGTTCACG
    241 GCCGCGTACC TCGGCTGCCT GTACGCGGGT CTGGCCGCCG TACCGGCGCC GCTGCCCGGG
    301 GGGCGCCACT TCGAACGCCG CCGTGTCGCG GCCATCGCCG CCGACAGCGG AGCCGGCGTG
    361 GTGCTGACCG TCGCGGGTGA GACCGCCTCC GTCCACGACT GGCTGACCGA GACCACGGCC
    421 CCGGCTACTC GCGTCGTGGC CGTGGACGAC CGGGCGGCGC TCGGCGACCC GGCGCAGTGG
    481 GACGACCCGG GCGTCGCGCC CGACGACGTG GCTCTCATCC AGTACACCTC GGGCTCGACC
    541 GGCAACCCCA AGGGCGTGGT CGTGACCCAC GCCAACCTGC TGGCGAACGC GCGGAATCTC
    601 GCCGAGGCCT GCGAGCTGAC CGCCGCCACT CCCATGGGCG GCTGGCTGCC CATGTACCAC
    661 GACATGGGGC TCCTGGGCAC GCTGACACCG GCCCTGTACC TCGGCACCAC GTGCGTGCTG
    721 ATGAGCTCCA CGGCATTCAT CAAACGGCCG CACCTGTGGC TACGGACCAT CGACCGGTTC
    781 GGCCTGGTCT GGTCGTCGGC TCCCGACTTC GCGTACGACA TGTGTCTGAA GCGCGTCACC
    841 GACGAGCAGA TCGCCGGGCT GGACCTGTCC CGCTGGCGGT GGGCCGGCAA CGGCGCGGAG
    901 CCCATCCGGG CAGCCACCGT ACGGGCCTTC GGCGAACGGT TCGCCCGGTA CGGCCTGCGC
    961 CCCGAGGCGC TCACCGCCGG CTACGGGCTG GCCGAGGCCA CCCTGTTCGT GTCGAGGTCG
   1021 CAGGGGCTGC ACACGGCACG AGTCGCCACC GCCGCCCTCG AACGCCACGA ATTCCGCCTC
   1081 GCCGTACCCG GCGAGGCAGC CCGGGAGATC GTCAGCTGCG GTCCCGTCGG CCACTTCCGC
   1141 GCCCGCATCG TCGAACCCGG CGGGCACCGT GTTCTGCCGC CCGGCCAGGT CGGCGAGCTG
   1201 GTCCTCCAGG GAGCCGCCGT CTGCGCCGGC TACTGGCAGG CCAAGGAGGA GACCGAGCAG
   1261 ACCTTCGGCC TCACCCTCGA CGGCGAGGAC GGTCACTGGC TGCGCACCGG CGATCTCGCC
   1321 GCCCTGCACG AAGGGAATCT CCACATCACC GGCCGCTGCA AAGAGGCCCT GGTGATACGA
   1381 GGACGCAATC TGTACCCGCA GGACATCGAG CACGAACTCC GCCTGCAACA CCCGGAACTT
   1441 GAGAGCGTCG GCGCCGCGTT CACCGTCCCG GCGGCACCTG GCACGCCGGG CTTGATGGTG
   1501 GTCCACGAAG TCCGCACCCC GGTCCCCGCC GACGACCACC CGGCCCTGGT CAGCGCCCTG
   1561 CGGGGGACGA TCAACCGCGA ATTCGGACTC GACGCCCAGG GCATCGCCCT GGTGAGCCGC
   1621 GGCACCGTAC TGCGTACCAC CAGCGGCAAG GTCCGCCGGG GCGCCATGCG TGACCTCTGC
   1681 CTCCGCGGGG AGCTGAACAT CGTCCACGCG GACAAGGGCT GGCACGCCAT CGCCGGCACG
   1741 GCCGGAGAGG ACATCGCCCC CACTGACCAC GCTCCACATC CGCACCCCGC GTAATCGCCG
   1801 GAGGGCGGCC CTGCCCTGGA ACGGGCACCG CGGTGCCCGC CGACAGCGAG GAGTAGCTCC
   1861 ACATGAACCC GCCCGAAGCG GTCAGCACGC CCAGCGAGGT CACCGCGTGG ATCACCGGAC
   1921 AGATCGCCGA GTTCGTGAAC GAGACACCCG ACCGGATCGC CGGTGACGCA CCCCTGACCG
   1981 ACCATGGCCT CGACTCCGTC TCCGGAGTTG CCCTCTGCGC GCAGGTCGAG GACCGCTACG
   2041 GGATCGAGGT CGACCCGGAG CTGCTGTGGA GCGTCCCCAC ACTCAACGAG TTCGTCCAGG
   2101 CACTGATGCC CCAGTTGGCC GACCGCACCT G
回复此楼

» 猜你喜欢
眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
1楼 2009-03-06 19:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmjiang

银虫 (小有名气)
★ ★
yghboy168(金币+1):谢谢参与
yghboy168(金币+1,VIP+0):80 3-7 10:38
Up:
cttCATATGATGGGCGGCTGGCTGCCCATGT
Down:
cttTCTAGATTACGCGGGGTGCGGATGTGGA

你要用PFU扩超过2KB的片段很困难，你只是表达基因，用ORF就行了

[ Last edited by wmjiang on 2009-3-9 at 22:32 ]
赞一下(6人) 回复此楼
2楼2009-03-06 22:42:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★ ★
yghboy168(金币+1):谢谢参与
yghboy168(金币+1,VIP+0):70 3-7 10:38
gc含量比较高，用保真性比较高的酶
赞一下(6人) 回复此楼
会当凌绝顶，一览众山小
3楼2009-03-07 00:18:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muchong5577

金虫 (正式写手)
★ ★
yghboy168(金币+1):谢谢参与
yghboy168(金币+1,VIP+0):90 3-7 10:38
上游：5‘ CAT  ATG  AGT  GAG  AGC  CGC  TGT  GCC  G  3’  
下游：5‘ TCT  AGA  CAG  GTG  CGG  TCG  GCC  AAC  TG  3’
两引物Tm相差3℃，建议退火温度：65.3-5=60℃
如不是接着做TA克隆，可各在上下游引物5‘端加保护碱基(CC),(GC).
赞一下(6人) 回复此楼
4楼2009-03-07 00:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muchong5577

金虫 (正式写手)
GC 含量有71%，呵呵 KOD系列的酶不错，但是小日本的。
赞一下 回复此楼
5楼2009-03-07 00:20:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yghboy168

银虫 (小有名气)

我打算用PFU酶

我打算用PFU酶
回复此楼
眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
6楼2009-03-07 10:39:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猫三两只

金虫 (正式写手)
★
yghboy168(金币+1):谢谢参与
上下游没有要求到哪结束吗?

上游:ata   CAT ATG     GGG CAC TGC GGA CCT GG
   从第38个碱基开始,长17bp,62.4度
下游:aat   TCT AGA     CAG CAG CTC CGG GTC GAC
    到2066结束,长18bp,61.9度
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2009-03-07 13:45:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yghboy168

银虫 (小有名气)
基因是链霉菌NRPS基因簇中小片段基因。要整体克隆，然后重组到整合型载体表达
上引中，改为加入XbaI酶切位点，下引加入NotI 位点。
赞一下 回复此楼
眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
8楼2009-03-08 10:44:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guyue2885

银虫 (正式写手)
★
yghboy168(金币+1):谢谢参与
学习一下 呵呵
回复此楼
9楼2009-03-08 11:04:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cauzhangtao

木虫 (正式写手)
★
yghboy168(金币+1):谢谢参与
用primer3设计
回复此楼
10楼2009-03-08 11:21:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yghboy168 的主题更新
251/3返回列表123下一页
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴，则可能无法领取此贴金币
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408 312求调剂 +9 门路摸摸 2026-04-14 9/450 2026-04-14 11:12 by zhy10sdust
[考研] 08工学 309分求调剂 +10 Yin DY 2026-04-08 10/500 2026-04-14 10:56 by 不我拉绿卡
[考研] 274求调剂 +9 山阿蔓 2026-04-07 9/450 2026-04-14 10:26 by dick_runner
[考研] 271求调剂 +27 2261744733 2026-04-11 27/1350 2026-04-14 08:49 by gretl
[考研] 考研求调剂 +12 子木呐 2026-04-12 13/650 2026-04-14 01:19 by 王珺璞
[考研] 求调剂，985材料与化工348分 +9 涵竹刘 2026-04-11 14/700 2026-04-13 22:26 by 涵竹刘
[考研] 284求调剂 +16 让我上岸吧阿西 2026-04-09 16/800 2026-04-13 22:18 by pies112
[考研] 调剂 +27 不逢春 2026-04-07 28/1400 2026-04-13 20:19 by xxy88888
[考研] 一志愿双非085400电子信息344 求调剂，对材料和化学方向也感兴趣 +12 无情的小羊 2026-04-09 13/650 2026-04-13 14:17 by 张zhihao
[考研] 290调剂生物0860 +28 哇哈哈，。 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 01:16 by 幸免 ..
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 化工调剂求导师收留！一志愿失利，踏实肯干，有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 346，工科0854求调剂，专硕 +7 moser233 2026-04-10 8/400 2026-04-11 08:52 by 猪会飞
[考研] 一志愿211，化学310分，本科重点双非，求调剂 +23 努力奋斗112 2026-04-08 23/1150 2026-04-10 23:29 by 314126402
[考研] 复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
[考研] 求调剂，现在还能填的 +3 上岸小莹加油 2026-04-08 3/150 2026-04-08 14:30 by zhq0425
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭