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原梯度分离方法无法分开5种物质，怎样修改梯度分离方法？ 已有1人参与
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刚接触液相色谱，照搬了文献上梯度分离方法做5种标准样品，结果是完全不能分开出了一个长达7分钟的大峰。用该梯度方法做单个标样，标样都在8.9分钟左右出峰，出峰时间非常接近。想改进这个梯度方法把5种标样完全分离，可是不会改。求高手指导一下怎样改梯度分离方法呀？ 原方法 流速0.2ml/min 柱温40度 时间 流动相甲醇（含0.2%甲酸）的比例 流动相水（含0.2%甲酸）的比例 0.01 25 5 40 20 80 22 80 22.01 25 30 25 文献上色谱柱是shim-pack VP-ODS （2mm*250mm i.d.5微米） ， 我实验室只有C18反相柱子（4.6mmi.d.，150mm色谱柱长度，5UM色谱填料粒径）我照搬文献上原方法，结果分离效果非常不理想，如何改进原方法 |
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