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白羊m711

铁虫 (小有名气)

[求助] 原梯度分离方法无法分开5种物质,怎样修改梯度分离方法? 已有1人参与

刚接触液相色谱,照搬了文献上梯度分离方法做5种标准样品,结果是完全不能分开出了一个长达7分钟的大峰。用该梯度方法做单个标样,标样都在8.9分钟左右出峰,出峰时间非常接近。想改进这个梯度方法把5种标样完全分离,可是不会改。求高手指导一下怎样改梯度分离方法呀?
原方法  流速0.2ml/min   柱温40度
   时间        流动相甲醇(含0.2%甲酸)的比例      流动相水(含0.2%甲酸)的比例
0.01                            25
5                                 40
20                              80
22                               80
22.01                            25
30                                25

文献上色谱柱是shim-pack VP-ODS  (2mm*250mm  i.d.5微米) ,
我实验室只有C18反相柱子(4.6mmi.d.,150mm色谱柱长度,5UM色谱填料粒径)我照搬文献上原方法,结果分离效果非常不理想,如何改进原方法
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白羊m711

铁虫 (小有名气)

别人让我在等度下把所有单标的峰形、出峰时间优化好,我基本上优化好了,可是这对于改梯度方法又有什么帮助呢
2楼2018-02-03 18:54:37
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saowe

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 白羊m711 at 2018-02-03 18:54:37
别人让我在等度下把所有单标的峰形、出峰时间优化好,我基本上优化好了,可是这对于改梯度方法又有什么帮助呢

不看图没法给你说呢

发自小木虫Android客户端
3楼2018-02-04 22:22:45
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看你的描述,说明你8.9分钟左右时候梯度流动相的比例可以着重调整。
4楼2018-02-05 08:09:18
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白羊m711

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by saowe at 2018-02-04 22:22:45
不看图没法给你说呢
...

我另外开帖更详细的说了一下,您可以跳转http://muchong.com/t-12062268-1 看下  谢谢帮助
5楼2018-02-12 09:23:00
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