24小时热门版块排行榜    

查看: 875  |  回复: 5
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

muchong5577

金虫 (正式写手)

[交流] PCR的退火温度怎么选择

请问大家,PCR的退火温度一般是怎么确定的?
我想一次在一台PCR仪上扩下列片段,请问怎么确定一个统一的退火温度?
1. PCR产物长度1002bp、GC:70.7% ; P. 5.0 给出的最佳退火温度为67.5摄氏度。
2. 1089bp、70.5%;  66.7
3. 825bp、 70.1%;  67.3
4. 1170bp、70.4%;  65.4
5. 828bp、 64.6%;  63.8
6. 1938bp、68.4%;  66.0
7. 891bp、 72.8%;  66.7
8. 1206bp、67.2%;  65.3
9. 912bp、 72.3%;  66.9
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muchong5577

金虫 (正式写手)

刚才跑胶得出的结果
九个只扩出来一个
5楼2009-03-07 15:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

xmchen1015

银虫 (小有名气)


muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 3-6 20:10
58C,如果是有模板的话,58C或再低一些都可以,其实退火温度不需要刻意去要求,一般的PCR,52-60C就可以全解决。
2楼2009-03-06 13:57:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aga0110125

银虫 (小有名气)


muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 3-6 20:11
引物特异性够好的话,退火温度不是问题
3楼2009-03-06 14:04:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmjiang

银虫 (小有名气)


muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 3-6 20:11
GC:70.7% 含量太高了
60度吧
4楼2009-03-06 14:39:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 3/150 2026-03-02 11:45 by 刘兵
[考研] 295求调剂 +8 19171856320 2026-02-28 8/400 2026-03-02 11:19 by yuchj
[考研] 求调剂 +8 yunziaaaaa 2026-03-01 9/450 2026-03-02 11:03 by 黑!在干嘛
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +8 YXCT 2026-03-01 9/450 2026-03-02 11:01 by 无际的草原
[考研] 材料调剂 +6 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 7/350 2026-03-02 10:42 by Jy?
[考研] 282求调剂 +3 2103240126 2026-03-02 4/200 2026-03-02 09:25 by 汪!?!
[基金申请] 本子写完了,给DS兄弟看了,得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 0805总分292,求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
信息提示
请填处理意见