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liqiong_515

铜虫 (小有名气)

[求助] 原子力显微镜测DNA形貌已有1人参与

各位虫友有没有会用原子力显微镜测DNA形貌的大神呀!最近被这个问题困扰需要大神的帮助,请各位大神不吝赐教

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拥抱阳光我会过得更好!
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

这是十几年前文献报道的工作,如果AFM系统(美国的)还可以的话,观测DAN并不难的,DNA越长更好观察,将DNA溶液滴到云母片上,干后空气中就可以观察,也可以在水溶液观察。
Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
2楼2018-01-30 19:45:45
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liqiong_515 at 2018-01-31 12:44:58
能说具体一点吗,比如说DNA的浓度,要固定多久,要不要加氯化镁,要不要用氮气吹
...

MaCl2,mM级别就可以了,不能多,多了吸水强不容易干,扫描针尖污染严重,你可以稀释几个浓度尝试,DNA浓度小更有利获得好的图像质量,不用N2催,保干器中放置2小时就可以了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
4楼2018-01-31 14:38:49
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liqiong_515 at 2018-01-31 16:20:34
那DNA滴上去后要不要用水冲洗
...

如果浓度低就没必须水洗,如果高的话,可以水浸一下,倾斜基板或用气体吹有利于长链DNA拉直。
Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
6楼2018-01-31 20:18:51
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

要看DNA链有多长,要想看到高质量图像,基板mica没有问题,然后就是样品不能有污染物(溶液残留物和空气吸附物),AFM针尖尺寸也十分重要,先用普通针尖检查样品,如果觉得样品质量可以的话,再换成很细的AFM 针尖,就可以了。
Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
8楼2018-02-01 14:12:22
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