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【请问】 GPC测试需要多少试样？
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由于试样量很少，想知道进行GPC测试大概需要多少试样？ [ Last edited by yogidan on 2009-3-5 at 18:49 ] |
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呵呵，哥们儿，看来你还是不了解我啊，不要说在小木虫上了，就是在仪器信息网上也没人敢对我这么说话，你厉害！你是80后吧？一看就很有性格，总爱出口伤人。不过我不会与你计较。 一般地，传统的单一检测器的GPC，例如：由液相色谱仪改造而来的GPC，只需要进样量20ul（微升）或稍多，而且对浓度没有很精确的要求，一般只有一个浓度范围。这个范围对应于柱子的分离能力和检测器的量程。而浓度的具体大小，则也与分子量有关系！当分子量越大时，浓度应该减小；反之，浓度应该增大。但是浓度太大，则会出现堵柱子，而且也会使检测器出现平头峰；浓度太小则会出现检测器检测不到信号的情况。一般都在几毫克/毫升的浓度比较合适。 对于先进的多检测器GPC，则进样量要大很多了，至少也要50ul，甚至100、200ul也不稀奇。这样算下来，样品量就不少了。 之所以说可能需要很多样品，是因为与具体方法有关。如果样品本身是没有经典的GPC方法，需要摸索、建立一个新方法的话，那么样品需要量确实会大一些，特别是对一些新合成的样品，你很难确定他用什么溶剂溶解样品更合适，这时候就需要你去尝试，此时样品消耗是很大的！例如，我在仪器信息网上介绍过的聚乳酸样品的情况就是如此：当样品高度支化甚至成为星形支化时，传统的THF溶剂已经不能用了，需要换溶剂！而做出这一判断也是非常难的！在这一过程中，样品的消耗是非常大的，虽然浓度很低。但是由于进样频繁，所以配制的样品溶液，会较快消耗。 此外，样品量过少，也会带来样品典型性差的问题。所以，在工业生产企业的质量检验中，往往需要较大的样品量来配制成较多的样品溶液以避免典型性不足的问题，尽管实际进样量很小。 样品量少，往往是由于聚合规模小，实验室的小型合成，或者样品是昂贵、难得的生化类样品，如：蛋白质、多糖等。解决这类问题，可以选择微量GPC，但是价格非常昂贵。一般地，聚合物都不存在这类问题，无非是多聚合些样品出来，样品本身不是很值钱。而对于生化类样品，一般GPC就没办法了，要么多弄些样品，要么买微量GPC。但是一般也是选择前者，因为你还需要作重复性和重现性呢，并不是做一次进样就完了！最起码要进两针啊。如果遇到柱效有问题，那么你还需要重新做标准曲线。 |
10楼2009-03-06 10:38:40
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