24小时热门版块排行榜    

查看: 870  |  回复: 7
当前主题已经存档。

gutidog

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】EB会与单链DNA结合引起荧光增强吗?

如题,在实验中发现,在EB溶液中仅仅加入单链引物,也会使荧光有显著增强,一开始怀疑我的引物有问题,后来问订购的那个公司,可是合成部的人告诉我如果单链中有碱基G,EB也能与其结合,是这样吗?后来查资料也没得到具体的答案。不知是否有人碰到过这个问题,请教了,谢谢!
回复此楼
从一个深渊跳入另一个!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 9-16 17:17
??
我只知道EB对单链DNA的嵌入性很差
比如逆转录后的cDNA跑出来是模模糊糊的
还有我做BSP,重亚硫酸盐处理后的DNA跑胶也是模模糊糊的
用EB染
可能用其他染料会好些
2楼2009-03-05 13:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hihoney

铁杆木虫 (职业作家)


单链可以用EB染的。
3楼2009-03-05 13:17:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liontears

金虫 (初入文坛)

而且有可能是引物形成二聚体,导致EB的信号强一些。
4楼2009-03-05 13:38:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

EB主要是和双链DNA结合,但是和单链结合的效率比较低,所以,即使结合的话,荧光检测效果也不会太好。
会当凌绝顶,一览众山小
5楼2009-03-05 17:11:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hihoney

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
单链染色可以看得见,只是小片段要用高浓度的胶才不会有大的扩散。
6楼2009-09-16 16:04:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqk198738

金虫 (正式写手)

有肯呢的吧


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我看过的POB上说过单链的RNA可以结合EB的,但是还没发现有过单链DNA能结合的,看上面的一位老兄说要是二聚的话就有可能,我觉得也有可能,但是一般二聚引物早就跑出去了,我觉得还是自身的聚合可能性跟大些,毕竟有很多的回文结构还是有肯能的,不知道各位同意否?再者,单链DNA也不是没有高级结构啊,就像RNA一样。有了高级结构如果电泳液pH影响不大,就要粘上EB了。不尽的地方望大家批评一下。
7楼2009-09-16 17:06:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hihoney

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
跑的引物就可以看得见。

引物都 会有 二聚体 吧。
8楼2009-09-16 17:51:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gutidog 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +6 启萌科技 2026-08-12 21/1050 2026-08-14 19:48 by 启萌科技
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-14 18:36 by 正能量1斤
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见