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铁虫 (小有名气)

[交流] 急求荧光光度计定性定量法

我要用荧光光度计测定本身带有荧光的蛋白质溶液，问题有三：
一是如何用荧光光度计确定测定荧光所用的波长，这是最关键的。即如何确定发射波长，激发波长？最好不用激发波长，因为我自身带荧光，想光用发射波长。
二：定量的确定。
有谁知道请不吝赐教

1楼 2009-03-05 11:11:49

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金虫 (小有名气)

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jsys(金币+1,VIP+0):感谢关注，并提出自己的看法！ 3-5 15:47

可以先用紫外分光光度计扫描一下，紫外吸收的波长大概就是物质的激发波长；

其它方法如楼上所说

3楼2009-03-05 12:28:33

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金虫 (小有名气)

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jsys(金币+2,VIP+0):感谢关注！ 3-5 15:46

先设定一个发射波长，以后扫描激发波长，找到最大激发波长，以后，设定激发波长为最大激发波长后，在这个条件下，扫描发射波长，这样就能找到最大发射波长了。
定量的话，需要将仪器的EX和EM波长都设定到最大波长处，先做工作曲线，然后进行测定

2楼2009-03-05 12:24:52

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