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化学专业

铁虫 (小有名气)

[交流] 急求荧光光度计定性定量法

我要用荧光光度计测定本身带有荧光的蛋白质溶液,问题有三:
一是如何用荧光光度计确定测定荧光所用的波长,这是最关键的。即如何确定发射波长,激发波长?最好不用激发波长,因为我自身带荧光,想光用发射波长。
二:定量的确定。
有谁知道请不吝赐教
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gaojcon

金虫 (小有名气)

★ ★
jsys(金币+2,VIP+0):感谢关注! 3-5 15:46
先设定一个发射波长,以后扫描激发波长,找到最大激发波长,以后,设定激发波长为最大激发波长后,在这个条件下,扫描发射波长,这样就能找到最大发射波长了。
定量的话,需要将仪器的EX和EM波长都设定到最大波长处,先做工作曲线,然后进行测定
2楼2009-03-05 12:24:52
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jktc

金虫 (小有名气)


jsys(金币+1,VIP+0):感谢关注,并提出自己的看法! 3-5 15:47
可以先用紫外分光光度计扫描一下,紫外吸收的波长大概就是物质的激发波长;

其它方法如楼上所说
3楼2009-03-05 12:28:33
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