24小时热门版块排行榜    

查看: 1872  |  回复: 5
【悬赏金币】回答本帖问题,作者18288973959将赠送您 5 个金币

18288973959

新虫 (初入文坛)

[求助] 找不到合适的内参怎么办已有1人参与

最近用trizol提总RNA,提完后,用仪器检测RNA浓度与纯度(纯度A260/A280大约在1.9~2.1),然后将全部RNA配成相同浓度,接着进行逆转,做qPCR。很奇怪,在这种情况下各组内参基因跑出了差距很大的CT值,跨度7-13不等,理论上来说,不应该啊。正常对照组与实验组内参CT总是有比较大的差距,怎么办?前前后后,我已经提了两次RNA,用了不同的逆转录试剂盒,最终跑出来的趋势基本一致:CT内参<CT实验组。这么多内参基因都不稳定……都不想再摸索了。请问可以用总RNA量作为对照吗?(就是把个样品RNA配成相同浓度后逆转)@biostar2009
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anona

铜虫 (初入文坛)

楼主找到解决办法了么,遇到同样问题,actin 和GADPH 都一样
2楼2018-01-28 20:32:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyyz365

铜虫 (小有名气)

3楼2018-01-28 23:47:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

问一下,你确定搞明白qPCR原理了吗?
比如为什么要∆∆ct?具体指什么

我觉得你搞明白这个,可能你的问题就自解了
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2018-01-29 11:45:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大文盲

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 18288973959 at 2018-01-22 12:23:48
最近用trizol提总RNA,提完后,用仪器检测RNA浓度与纯度(纯度A260/A280大约在1.9~2.1),然后将全部RNA配成相同浓度,接着进行逆转,做qPCR。很奇怪,在这种情况下各组内参基因跑出了差距很大的CT值,跨度7-13不等 ...

楼主解决了吗,我遇到同样问题很苦恼,QQ469024841,想向您有偿咨询,跪谢

发自小木虫Android客户端
5楼2018-09-12 12:09:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Muggle1004

新虫 (初入文坛)

6楼2022-04-26 21:27:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 18288973959 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 七级岗,到手不到8000,带本科论文12教学分/生,额定教学分280 +26 河西夜郎 2024-05-02 29/1450 2024-05-07 10:28 by zhaojiang427
[有机交流] 酰胺合成 +3 Spiralup 2024-05-06 7/350 2024-05-07 09:35 by 88817753
[论文投稿] 请问如何进行查重? 6+4 fc5878 2024-05-06 4/200 2024-05-07 09:31 by 淼淼_2021
[教师之家] 博士毕业找工作选择! +11 gsq嘿嘿 2024-04-30 16/800 2024-05-07 09:29 by gsq嘿嘿
[基金申请] 特聘教授,算高级职称吗?青年基金还没结题的情况下还能报面上吗? +12 aasahr 2024-05-05 14/700 2024-05-07 09:22 by vmuch520
[论文投稿] 求各位大神推荐复合材料类中文核心 50+3 ayj080121 2024-05-01 5/250 2024-05-07 07:56 by 修为01
[有机交流] 长烷基链氰基水解成羧酸 求助 5+4 Sheerio 2024-05-05 9/450 2024-05-06 18:16 by 我想更懂你29
[教师之家] 领导好安排自己做杂事。在成果上给领导挂名,请其不要经常安排自己做杂事 +7 河西夜郎 2024-05-03 7/350 2024-05-06 17:56 by lyfbangong
[硕博家园] 去美国的华人导师底下读博后会很难出站吗? +7 Aries-FZU 2024-05-03 7/350 2024-05-06 17:46 by jmmchen
[考博] 2024还有没有补录的博士 +7 crazy peng 2024-04-30 8/400 2024-05-06 15:37 by 愿你快乐啊
[教师之家] 请教下各位,南京航空航天大学天目湖校区如何? +3 pp爱写论文 2024-05-05 4/200 2024-05-06 14:59 by eseayl
[考研] 要不要二战? +6 ajjznskk 2024-05-05 9/450 2024-05-06 11:36 by 卡皮吧啦123
[考博] 25年春秋博士申请 +4 梦想研究生 2024-05-04 7/350 2024-05-06 11:24 by 梦想研究生
[考研] 考研日记 +6 九三hs 2024-05-02 7/350 2024-05-06 09:14 by 九三hs
[考博] 求博导收留 +4 黑森林nono派 2024-05-06 4/200 2024-05-06 08:02 by 安塔瓦拉多
[论文投稿] 审稿人评审完成状态还是under review 5+3 ZH0826 2024-04-30 12/600 2024-05-06 08:01 by ZH0826
[催化] 孔径分布怎么分析? +3 林佳树 2024-05-02 7/350 2024-05-05 14:38 by 醉舞清风
[论文投稿] 想问下电池发在nano letters含金量高不高 +6 未来富婆蛙 2024-04-30 11/550 2024-05-05 10:53 by eemdl
[基金申请] 关于公布2024年度国家自然科学基金项目申请初审结果的通告 (金币+2) +12 hdzw9071 2024-04-30 18/900 2024-05-04 17:49 by felicity6056
[高分子] 高分子聚合物有机材料方向的合作/招聘科研助理 +3 wwwzg 2024-05-01 3/150 2024-05-02 21:38 by Dr. Zhang
信息提示
请填处理意见