应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 重组质粒
81/1返回列表
查看: 1780  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

无与伦比1314

新虫 (小有名气)

[求助] 重组质粒 已有3人参与

我的载体4000bp，目的片段2000bp，用的是无缝克隆，按理说重组质粒是6000bp，但跑胶结果显示只有3000bp，不知道是什么原因

@youlinglyw 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-01-14 13:06:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

前行的璐

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是没重组上，可以酶切或者pcr鉴定
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2018-01-14 15:50:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿门阿前1991

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒跑电泳大小不准确的，有条带只能说明提出质粒了，建议酶切看大小。
赞一下(2人) 回复此楼
总会出现一个温柔的人，让你变得温暖，然后默默离开。
3楼2018-01-15 08:55:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无与伦比1314

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 阿门阿前1991 at 2018-01-15 08:55:05
质粒跑电泳大小不准确的，有条带只能说明提出质粒了，建议酶切看大小。

但是用了无缝克隆后，没有酶切位点了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2018-01-15 10:29:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿门阿前1991

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 无与伦比1314 at 2018-01-15 10:29:30
但是用了无缝克隆后，没有酶切位点了
...

用载体上其它的酶切位点也可以的，因为不酶切的话，是超螺旋，大小会小一半。
赞一下(1人) 回复此楼
总会出现一个温柔的人，让你变得温暖，然后默默离开。
5楼2018-01-15 10:53:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Korea??

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 无与伦比1314 at 2018-01-15 10:29:30
但是用了无缝克隆后，没有酶切位点了
...

无缝连接就不能酶切了么？那么如何检验？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2018-01-16 14:32:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ksws0465326

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一，提取质粒选用载体序列上的酶切位点，单双酶切都可，算出片段大小，跑胶验证。
二，选取载体上游序列正向引物，与目的片段序列中的反向序列进行片段PCR，验证是否插入成功。
三，直接拿去测序。
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2018-01-16 15:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinxinjin

银虫 (知名作家)
你现在实验已经做完了吧

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2019-05-15 11:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 无与伦比1314 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +11 羊腰板 2026-08-21 11/550 2026-08-22 22:03 by lsbin3733
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-22 21:42 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 7/350 2026-08-22 21:39 by OEbVnUOu01ol
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +3 简单化xn 2026-08-22 7/350 2026-08-22 19:46 by 简单化xn
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 8/400 2026-08-22 18:29 by 淀粉搬运工
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭