24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1176  |  回复: 5

心死后死心

铜虫 (初入文坛)

[求助] 转化问题 已有1人参与

请教一下  有人把6000多bp的质粒导入过DH5α   感受态吗?化转法  30感受态+1质粒 冰水浴30min  42度90s  冰水浴2min  无抗培养基复苏40min 30微涂板   18小时都没有长出来

@youlinglyw 发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1006641214

木虫 (正式写手)

wublab

你好
2楼2018-01-13 15:38:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昨夜雪寒

新虫 (初入文坛)

关键是你转化过程中手法怎么样,全程不能用枪吹吸的,不然感受态菌就都死了

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-01-13 16:31:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莫落

木虫 (正式写手)

效率是不是太低了,下次多涂一点

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-01-13 18:06:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keyangbin

铜虫 (小有名气)

第一,感受态细胞的量是30ul吗?如果是就太少?一般要100ul,转10  ul的质粒水稀释液,质粒量10ng到50ng左右。二,复苏后涂板是都涂对质粒抗性的平板。

发自小木虫Android客户端
5楼2018-01-13 19:36:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+200 2018-01-24 08:34:09
silicare: 金币+100 2018-01-24 08:34:18
1. 42度,一般30-45秒。你那个基本烫死了
2. 一般长菌要等16个小时
3. 阳性对照很重要!!!同时做一个已知好用质粒的转化,如果有菌就排除是感受态问题。
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
6楼2018-01-13 22:07:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 心死后死心 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +9 辰沐5211314 2026-03-26 9/450 2026-03-29 01:12 by 我是小康
[考研] 295求调剂 +4 wei-5 2026-03-26 4/200 2026-03-28 23:20 by 小木虫tim
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-27 5/250 2026-03-28 14:25 by 唐沐儿
[考研] 求化学调剂 +4 wulanna 2026-03-28 4/200 2026-03-28 13:37 by 唐沐儿
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +6 脚滑的守法公民 2026-03-27 6/300 2026-03-28 11:02 by gjlllb
[考研] 291求调剂 +7 孅華 2026-03-22 7/350 2026-03-28 04:02 by fmesaito
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
信息提示
请填处理意见