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wuqianqian

新虫 (初入文坛)

[求助] 求教去磷酸化WB的问题 已有1人参与

通过原核表达获得磷酸酶,希望其能使磷酸激酶去磷酸化,但是始终做不出来,仍然能检测出磷酸化条带,磷酸酶我检测过是有活性的,但是wb一直失败,求大神指导,快毕业了真的很着急,在此谢过了!

@gyesang 发自小木虫Android客户端
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wuqianqian

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by fano8o9sin at 2018-01-12 17:49:04
问题说的很粗放,是不是WB实验操作的问题了

我的目的是检测磷酸酶的去磷酸化作用,底物是已经发生了自磷酸化的激酶,反应液是磷酸酶的反应液,并加入磷酸酶和激酶,37度反应30min后,跑wb,用磷酸化抗体去检测,结果条带和对照只加激酶的磷酸化条带一样,期间摸索过磷酸酶加的量的问题,试过多个浓度剃度,也未见磷酸化条带减弱,很是苦恼!

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3楼2018-01-12 19:09:04
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fano8o9sin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
问题说的很粗放,是不是WB实验操作的问题了

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2018-01-12 17:49:04
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