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wuqianqian新虫 (初入文坛)
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[求助]
求教去磷酸化WB的问题 已有1人参与
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通过原核表达获得磷酸酶，希望其能使磷酸激酶去磷酸化，但是始终做不出来，仍然能检测出磷酸化条带，磷酸酶我检测过是有活性的，但是wb一直失败，求大神指导，快毕业了真的很着急，在此谢过了！ @gyesang 发自小木虫Android客户端 |
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金虫 (正式写手)
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- 性别: GG
- 专业: 内分泌系统疾病/代谢异常与
2楼2018-01-12 17:49:04
wuqianqian
新虫 (初入文坛)
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- 专业: 临床微生物学检验
送红花一朵 |
我的目的是检测磷酸酶的去磷酸化作用，底物是已经发生了自磷酸化的激酶，反应液是磷酸酶的反应液，并加入磷酸酶和激酶，37度反应30min后，跑wb,用磷酸化抗体去检测，结果条带和对照只加激酶的磷酸化条带一样，期间摸索过磷酸酶加的量的问题，试过多个浓度剃度，也未见磷酸化条带减弱，很是苦恼！ 发自小木虫Android客户端 |
3楼2018-01-12 19:09:04