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-excelsior

新虫 (初入文坛)

[求助] β-半乳糖苷酶实验 质粒构建问题

我在用placZ15构建目的质粒的过程中遇到一些问题:第一次pcr鉴定有阳性菌落,取第一次鉴定阳性的菌落分区划线,再密集化线之后,进行第二次pcr鉴定时,始终出现阴性结果。跟课题组的师兄师姐都没有找到问题所在,请各位老师赐教!
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

赞同2楼的说法,第一次筛选到的有可能是假阳性,或者筛选到的种子不纯,在后续富集的时候丢失了
···
4楼2018-01-10 13:31:46
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查看全部 7 个回答

wuyuanqing

金虫 (正式写手)


小冀-: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-10 13:32:05
很正常,没做成功,重新做。至于第一次出现的,是假阳性。

发自小木虫Android客户端
2楼2018-01-10 12:29:18
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易科学平台

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2018-01-10 12:32:04
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-excelsior

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小冀- at 2018-01-10 13:31:46
赞同2楼的说法,第一次筛选到的有可能是假阳性,或者筛选到的种子不纯,在后续富集的时候丢失了

谢谢指点!请问一下一般这种目的片段的丢失跟什么有关呀?难道是我目的片段的长度太长了吗?我做了7个不同的片段,现在都是遇到了这种同样的问题。
5楼2018-01-10 19:57:51
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