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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » β-半乳糖苷酶实验 质粒构建问题
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-excelsior

新虫 (初入文坛)

[求助] β-半乳糖苷酶实验 质粒构建问题

我在用placZ15构建目的质粒的过程中遇到一些问题：第一次pcr鉴定有阳性菌落，取第一次鉴定阳性的菌落分区划线，再密集化线之后，进行第二次pcr鉴定时，始终出现阴性结果。跟课题组的师兄师姐都没有找到问题所在，请各位老师赐教！
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1楼 2018-01-10 12:24:20
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wuyuanqing

金虫 (正式写手)
★
小冀-: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-10 13:32:05
很正常，没做成功，重新做。至于第一次出现的，是假阳性。

发自小木虫Android客户端
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2楼2018-01-10 12:29:18
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易科学平台

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2018-01-10 12:32:04
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
赞同2楼的说法，第一次筛选到的有可能是假阳性，或者筛选到的种子不纯，在后续富集的时候丢失了
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···
4楼2018-01-10 13:31:46
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-excelsior

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小冀- at 2018-01-10 13:31:46
赞同2楼的说法，第一次筛选到的有可能是假阳性，或者筛选到的种子不纯，在后续富集的时候丢失了

谢谢指点！请问一下一般这种目的片段的丢失跟什么有关呀？难道是我目的片段的长度太长了吗？我做了7个不同的片段，现在都是遇到了这种同样的问题。
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5楼2018-01-10 19:57:51
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-excelsior

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wuyuanqing at 2018-01-10 12:29:18
很正常，没做成功，重新做。至于第一次出现的，是假阳性。

好的，谢谢回复！
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6楼2018-01-10 19:58:36
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by -excelsior at 2018-01-10 19:57:51
谢谢指点！请问一下一般这种目的片段的丢失跟什么有关呀？难道是我目的片段的长度太长了吗？我做了7个不同的片段，现在都是遇到了这种同样的问题。...

应该是构建没有成功，重新构建吧~
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···
7楼2018-01-15 10:27:25
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