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星城辛未

木虫 (正式写手)

[求助] ABTS+吸光度测试 已有3人参与

按照文献中的方法,以ABTS(7mmol, 10 equiv.)+K2S2O8(4.9mmol, 7 equiv.)的水溶液按1:1的体积比混合,避光情况下储存12-16h,第二天以乙醇稀释40-60倍,摇匀,静置5min,放入比色皿中测734nm的吸光度(0.7左右),测试吸光度随时间变化关系,时长为30min,发现吸光度有很明显的下降,30min大概降到0.45左右,换做水稀释时,吸光度下降更为严重,30min大概降到0.15左右。后面要测特定物质湮灭自由基的能力,这种情况势必严重干扰结果,请问业内的专家们,出现这种问题的原因主要是什么?
(1)对ABTS、K2S2O8、乙醇和水等试剂的纯度有没有严格的要求?
(2)配置好的母液大概可以使用多久?
(3)还有哪些可能出问题的地方?
望不吝赐教,谢谢!!
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疯人院病号

禁虫 (初入文坛)

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4楼2018-05-28 18:12:16
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查看全部 23 个回答

1970757203_s

金虫 (小有名气)

请问楼主问题解决了吗?
2楼2018-05-12 21:34:44
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星城辛未

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 1970757203_s at 2018-05-12 21:34:44
请问楼主问题解决了吗?

解决了

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-05-12 23:44:31
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星城辛未

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 疯人院病号 at 2018-05-28 18:12:16
请问楼主是怎么解决的?我正要做这个实验呢,打算用水稀释,请问你的母液可以放置多久?用什么来稀释的?还有你的空白调零是怎么设置的呢?请楼主帮帮忙。。。

配置完避光放置12-14h左右,最好尽快使用,不超过3天。我是用无水乙醇稀释的,用测试样品的溶剂作为阴性对照,溶剂+ABTS测试液作为阳性对照
5楼2018-05-28 19:27:31
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