24小时热门版块排行榜    

查看: 3618  |  回复: 22

星城辛未

木虫 (正式写手)

[求助] ABTS+吸光度测试 已有3人参与

按照文献中的方法,以ABTS(7mmol, 10 equiv.)+K2S2O8(4.9mmol, 7 equiv.)的水溶液按1:1的体积比混合,避光情况下储存12-16h,第二天以乙醇稀释40-60倍,摇匀,静置5min,放入比色皿中测734nm的吸光度(0.7左右),测试吸光度随时间变化关系,时长为30min,发现吸光度有很明显的下降,30min大概降到0.45左右,换做水稀释时,吸光度下降更为严重,30min大概降到0.15左右。后面要测特定物质湮灭自由基的能力,这种情况势必严重干扰结果,请问业内的专家们,出现这种问题的原因主要是什么?
(1)对ABTS、K2S2O8、乙醇和水等试剂的纯度有没有严格的要求?
(2)配置好的母液大概可以使用多久?
(3)还有哪些可能出问题的地方?
望不吝赐教,谢谢!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

星城辛未

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 疯人院病号 at 2018-05-29 09:07:44
楼主你的阳性对照是不是设置有误?

我查的文献是说PBS或者乙醇稀释比较好,水应该问题也不大,阳性对照没问题,溶剂加ABTS测试液。留个微信或者邮箱?资料可以发给你
8楼2018-05-29 09:35:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星城辛未

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 疯人院病号 at 2018-05-28 18:12:16
请问楼主是怎么解决的?我正要做这个实验呢,打算用水稀释,请问你的母液可以放置多久?用什么来稀释的?还有你的空白调零是怎么设置的呢?请楼主帮帮忙。。。

配置完避光放置12-14h左右,最好尽快使用,不超过3天。我是用无水乙醇稀释的,用测试样品的溶剂作为阴性对照,溶剂+ABTS测试液作为阳性对照
5楼2018-05-28 19:27:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星城辛未

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 日渐秃头 at 2018-11-26 21:55:55
楼主你好 麻烦问下吸光度怎么调到0.7的...我稀释后吸光度为负数呢……

拿无水乙醇稀释的,倍数太高了吧?还是参比没放好?我没出现过
14楼2018-11-27 09:19:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星城辛未

木虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 日渐秃头 at 2018-11-28 14:24:10
等一等 这个需要参比调零吗???我好像没看到过 用什么调零呢?
...

如果你是用紫外光谱仪,那就得用溶剂先调零么?用酶标仪倒不需要
16楼2018-11-29 09:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬酸循环

新虫 (初入文坛)

我配好的7.4mM的ABTS和2.6mM的过硫酸钾混匀4℃过夜后其氧化自由基工作液的吸光度只有0.1~0.2啊?不知道4度影响大不大,目前还没想清楚原因,求指导

发自小木虫IOS客户端
18楼2019-02-25 13:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

1970757203_s

金虫 (小有名气)

请问楼主问题解决了吗?
2楼2018-05-12 21:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星城辛未

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 1970757203_s at 2018-05-12 21:34:44
请问楼主问题解决了吗?

解决了

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-05-12 23:44:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯人院病号

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

4楼2018-05-28 18:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯人院病号

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

6楼2018-05-28 21:32:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯人院病号

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

7楼2018-05-29 09:07:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯人院病号

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

9楼2018-05-30 17:39:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gcc5413

木虫 (正式写手)

10楼2018-06-03 21:58:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 星城辛未 的主题更新
信息提示
请填处理意见