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lanlihua_011铁杆木虫 (正式写手)
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如何构建工程菌,表达蛋白酶分泌到培养基中? 已有1人参与
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我是学药的,想请教一个分子生物学的问题。我获得一株菌,可以分泌某个蛋白酶到细菌培养基中,但这是个病原菌。该酶的基因已知。我想要将这个酶大量表达在培养基中,请问我如何才能将这个酶在E.coli(或其他表达载体)之中表达,现有的技术是否能够构建出分泌到培养基中的工程菌? 真心求教,金币好说 分子小白.....不胜感激.... |
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domopal
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分泌到培养基中涉及到信号肽。这要看这个酶的信号肽序列在大肠杆菌中能否正常发挥功能了,不行的话你可能要用大肠杆菌兼容性信号肽序列了,已经有相关商品化载体。 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2018-01-08 13:48:23
lanlihua_011
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【答案】应助回帖
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| 分泌到细胞外的蛋白一般都有信号肽或者转运体系吧,你去查一下,如果有信号肽,可以在大肠里表达一下,看能不能出来,如果效果不理想,就用大肠的信号肽试一下~如果他主要是同个特定的转运体系外排,可以胞内表达,破碎菌体获得蛋白 |
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6楼2018-01-11 09:43:31
lanlihua_011
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