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lanlihua_011

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 如何构建工程菌,表达蛋白酶分泌到培养基中? 已有1人参与

我是学药的,想请教一个分子生物学的问题。我获得一株菌,可以分泌某个蛋白酶到细菌培养基中,但这是个病原菌。该酶的基因已知。我想要将这个酶大量表达在培养基中,请问我如何才能将这个酶在E.coli(或其他表达载体)之中表达,现有的技术是否能够构建出分泌到培养基中的工程菌?

真心求教,金币好说

分子小白.....不胜感激....
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domopal

铁杆木虫 (正式写手)

分泌到培养基中涉及到信号肽。这要看这个酶的信号肽序列在大肠杆菌中能否正常发挥功能了,不行的话你可能要用大肠杆菌兼容性信号肽序列了,已经有相关商品化载体。

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2楼2018-01-08 13:48:23
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lanlihua_011

铁杆木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by domopal at 2018-01-08 13:48:23
分泌到培养基中涉及到信号肽。这要看这个酶的信号肽序列在大肠杆菌中能否正常发挥功能了,不行的话你可能要用大肠杆菌兼容性信号肽序列了,已经有相关商品化载体。
...

大神,可否提供商品化载体的名称或者试剂公司名称,苦于不知道从何去找啊
3楼2018-01-08 16:41:27
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)


分泌用毕赤酵母表达系统

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4楼2018-01-08 23:30:49
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lanlihua_011

铁杆木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by biosci at 2018-01-08 23:30:49
分泌用毕赤酵母表达系统

感谢提供信息~
5楼2018-01-09 08:53:49
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
分泌到细胞外的蛋白一般都有信号肽或者转运体系吧,你去查一下,如果有信号肽,可以在大肠里表达一下,看能不能出来,如果效果不理想,就用大肠的信号肽试一下~如果他主要是同个特定的转运体系外排,可以胞内表达,破碎菌体获得蛋白

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···
6楼2018-01-11 09:43:31
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lanlihua_011

铁杆木虫 (正式写手)

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引用回帖:
6楼: Originally posted by 小冀- at 2018-01-11 09:43:31
分泌到细胞外的蛋白一般都有信号肽或者转运体系吧,你去查一下,如果有信号肽,可以在大肠里表达一下,看能不能出来,如果效果不理想,就用大肠的信号肽试一下~如果他主要是同个特定的转运体系外排,可以胞内表达, ...

好的 感谢感谢^_^

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7楼2018-01-11 21:07:49
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