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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 请问有大神跑过大分子量(约400kd)的蛋白吗？求分享，实验小白感激不尽
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喃喃julane

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问有大神跑过大分子量(约400kd)的蛋白吗？求分享，实验小白感激不尽 已有1人参与

最近要跑大约400kd的蛋白WB,请问有大神跑过高分子量的吗，求分享经验(mark，胶的浓度，电泳的电压和时间以及转膜条件)，实验小白感激不尽，先谢了

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1楼 2018-01-07 11:41:46
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fanray110

木虫 (正式写手)
蛋白太大，不一定能纯化出来。marker使用themo scientific的。配胶使用康为的SDS-PAGE试剂盒，浓度根据自己的蛋白大小来配。电泳80-150自己根据蛋白电泳速度来。转膜300-500m都行，时间一般1-2.5小时。

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人常在什么都可以自由自在的时候，却被这种随心所欲的自由蒙蔽，虚掷时光而毫无知觉！
2楼2018-01-07 13:17:33
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匿名

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3楼2018-01-07 14:13:14
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fanray110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by celbiology at 2018-01-07 14:13:14
做WB为什么要纯化呢？
...

我的意思是你的蛋白能提取出来吗？

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4楼2018-01-07 21:44:42
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匿名

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5楼2018-01-08 01:51:41
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fanray110

木虫 (正式写手)
做的东西不一样。知道为什么还问我？

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6楼2018-01-08 15:13:40
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chaosyw

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
告诉蛋白名称的话可以帮你找找相应的sci文献，借鉴一下别人wb的实验条件
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7楼2018-01-09 07:21:48
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