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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 菌体PCR为什么p不出来
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charmingL

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌体PCR为什么p不出来 已有1人参与

我现在做一个酶基因的重组，基因和质粒酶切之后连接，然后转化到大肠杆菌感受态细胞里，每次平板上都能长出菌落，但是菌体PCR一直p不出来，请各位大佬帮忙分析一下原因~谢谢😜
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1楼 2018-01-04 21:34:38
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xshq1982

银虫 (正式写手)
为什么要做菌落pcr，难道没有自连的载体吗。还是抽质粒后酶切吧

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2楼2018-01-04 21:43:01
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聪明的胖子

新虫 (初入文坛)
可以直接挑斑，摇菌抽质粒，酶切验证一下啊，为啥非要菌液PCR啊

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3楼2018-01-12 21:36:29
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

可能引物不好用，你用质粒做一下阳性对照。
挑菌长出来，测序才是王道
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2018-01-13 12:34:34
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