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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 500ml M9培养基培养大肠杆菌，菌液变的偏绿，有酸臭味，OD600很难达到1
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小花龙牙草

新虫 (初入文坛)

[求助] 500ml M9培养基培养大肠杆菌，菌液变的偏绿，有酸臭味，OD600很难达到1 已有1人参与

最近用M9培养基培养Rosetta（DE3）菌种，先用5mlLB复苏冻存的甘油菌，复苏完在转到50ml M9中培养过夜，这一步是能长起来的，但是菌液已经开始有点偏绿酸臭了。再将这50ml的菌液转到大瓶M9中培养，摇了20多个小时，OD600才长到0.6，菌液也变得比较绿酸臭了。

以前也做过M9表达是正常的，搬到新实验室就做不出来了，不知道是为什么。求助
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1楼 2018-01-02 11:20:24
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xiecj

木虫 (著名写手)
我的M9是买的，当时一直长不起来，我问技术也是说培养基长的很好，很奇怪

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6楼2018-01-02 15:11:45
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xiecj

木虫 (著名写手)
为啥我在m9中长的细菌基本上只能到0.2？

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2楼2018-01-02 13:55:09
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小花龙牙草

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiecj at 2018-01-02 13:55:09
为啥我在m9中长的细菌基本上只能到0.2？

啊？一般大肠杆菌在M9可以长的，只是比LB中长的慢一些。我以前做的，一般大约10个小时就能长到1.0了。如果想让菌长的快一些，可以加一点LB。

那你的长到0.2能用于表达蛋白吗？
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3楼2018-01-02 14:50:21
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xiecj

木虫 (著名写手)
不是，我的大肠在LB中长的很欢乐，但是M9中几乎不怎么长，对了这个细菌的品系是pbr322

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4楼2018-01-02 14:51:37
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