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小花龙牙草

新虫 (初入文坛)

[求助] 500ml M9培养基培养大肠杆菌,菌液变的偏绿,有酸臭味,OD600很难达到1 已有1人参与

最近用M9培养基培养Rosetta(DE3)菌种,先用5mlLB复苏冻存的甘油菌,复苏完在转到50ml M9中培养过夜,这一步是能长起来的,但是菌液已经开始有点偏绿酸臭了。再将这50ml的菌液转到大瓶M9中培养,摇了20多个小时,OD600才长到0.6,菌液也变得比较绿酸臭了。

以前也做过M9表达是正常的,搬到新实验室就做不出来了,不知道是为什么。求助
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xiecj

木虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 小冀- at 2018-01-04 11:30:23
Pbr322的在M9上是完全可以长得,10个小时OD到1没有问题,变绿变臭怀疑是你菌种不纯,有杂菌,可以分纯一下...

摇床培养的,条件是哪些?能细说一下不

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10楼2018-01-04 11:31:29
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xiecj

木虫 (著名写手)

为啥我在m9中长的细菌基本上只能到0.2?

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2楼2018-01-02 13:55:09
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小花龙牙草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiecj at 2018-01-02 13:55:09
为啥我在m9中长的细菌基本上只能到0.2?

啊?一般大肠杆菌在M9可以长的,只是比LB中长的慢一些。我以前做的,一般大约10个小时就能长到1.0了。如果想让菌长的快一些,可以加一点LB。

那你的长到0.2能用于表达蛋白吗?
3楼2018-01-02 14:50:21
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xiecj

木虫 (著名写手)

不是,我的大肠在LB中长的很欢乐,但是M9中几乎不怎么长,对了这个细菌的品系是pbr322

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4楼2018-01-02 14:51:37
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