[交流] 细胞培养黑胶虫污染

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我会一直加油

1楼2018-01-01 22:15:33

ywwabc

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最好查一下是培养基等试剂还是细胞本身有污染，，别传染到其他细胞了，很明显的细菌污染

3楼2018-01-02 10:18:09

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敏敏gogo

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3楼: Originally posted by ywwabc at 2018-01-02 10:18:09
最好查一下是培养基等试剂还是细胞本身有污染，，别传染到其他细胞了，很明显的细菌污染

关于细菌来源的排查，您有什么经验吗？比如查培养基是否污染，我就把培养基放培养瓶中然后用显微镜观察就可以吗？谢谢您

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我会一直加油

4楼2018-01-02 12:12:20

小刀188

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黑胶虫污染的话，可以参照这个帖子（http://www.zfdows.com/h-pd-195.html#_pp=2_316），在细胞培养的时候，在400倍显微镜下看到小黑点在动，小黑点有时呈点状，有时呈小的片状，运动形式为在原地振动（类似布朗运动），这就是黑胶虫污染，可与细胞共生，细胞长的好或密度大的话，小黑点就少，反之则多。

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敏敏gogo

5楼2018-01-02 14:19:33

ywwabc

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引用回帖:

4楼: Originally posted by 敏敏gogo at 2018-01-02 12:12:20
关于细菌来源的排查，您有什么经验吗？比如查培养基是否污染，我就把培养基放培养瓶中然后用显微镜观察就可以吗？谢谢您
...

一般细菌在营养丰富以及适宜温度的时候增殖的很快的，但是如果在4度拿出来直接观察，这个时候有些可以看到，污染早期是很难看到的，所以可以取1-2ml培养基放到密闭容器里例如离心管，EP管（密闭是为了不传染到培养箱里的其他细胞）然后放置培养箱培养过夜或者24h，显微镜观察；当然细菌污染原因有很多，需要一一排查：例如实验器皿是否灭菌，培养基、血清等有木有问题；你使用的枪是否倒吸后经过消毒，还有细胞复苏的时候有没有让冻存管的口进水？如果都排查了，那就可能是细胞本身就有污染或者个人操作不当造成的啦

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敏敏gogo

6楼2018-01-02 15:27:08