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反向筛选法进行同源重组，实验总不成功，求大神指点
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1、 将GALK基因电转到SW102，通过同源重组， GALK基因插入到SW102（这一步通过菌落ＰＣＲ验证，验证是阳性菌落进行保菌）； 2、 将gp350基因电转到 已将GALK基因电转到SW102的菌株中，目的使gp350基因替换GALK基因，但是电转后涂板，总是没有菌落生长，且实验后之前保菌的GALK基因电转到SW102菌株经菌落PCR鉴定，也鉴定不出 GALK基因 电转到SW102阳性菌株 实验急，求大神指点@biostar2009 |
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