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Long777768

新虫 (初入文坛)

[求助] 反向筛选法进行同源重组,实验总不成功,求大神指点

1、  将GALK基因电转到SW102,通过同源重组, GALK基因插入到SW102(这一步通过菌落PCR验证,验证是阳性菌落进行保菌);          2、  将gp350基因电转到 已将GALK基因电转到SW102的菌株中,目的使gp350基因替换GALK基因,但是电转后涂板,总是没有菌落生长,且实验后之前保菌的GALK基因电转到SW102菌株经菌落PCR鉴定,也鉴定不出 GALK基因 电转到SW102阳性菌株  

实验急,求大神指点@biostar2009
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zengxin1

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 感觉走 at 2020-07-27 21:43:52
您好,请问楼主问题解决了吗,我现在做galk负筛选时,长出来很多单菌落,但PCR鉴定并不是重组成功的基因,请教楼主最后是如何解决的?

您好,请问问题解决了吗

发自小木虫Android客户端
3楼2021-02-25 17:03:18
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匿名

本帖仅楼主可见
2楼2020-07-27 21:43:52
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