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若行山水

铜虫 (小有名气)

[求助] 用Qubit 定量,DNA样本稀释后定量实际值和理论值偏差很大原因是什么? SOS SOS SOS

请问有没有在使用life Qubit DNA HS 定量的时候出现过以下问题:
1.  核酸片段分布在0-400bp,呈正态分布,中值为140bp(Agilent 2100检测);
2.  核酸DNA原始浓度为31ng/ul(TE溶解), 取4ul原始样本加16ulLOW TE稀释之后,定量,理论浓度应为6.2ng/ul, 但实际浓度仅用3.4ng/ul(重复2次)。测量总体积为22ul,样本损失将近50%。
3. 按照质量守恒定理是不应该有损失的,但是为什么会有这么大的损失,损失的样本去了哪里?
请哪位大神不吝赐教!
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加油!
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小小不点爱

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你有没有看看2100检测时各组分浓度和是否为31ng/ul,一般单纯的稀释用qubit定量不会有这么大的误差,初步猜测原样本有杂质污染。
2楼2017-12-28 10:42:12
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