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酵母重组蛋白纯化问题 已有3人参与
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用酵母做重组，表达融合蛋白约9.7K，属于分泌型表达，含His-tag，取上清10倍浓缩后进行Tri-sds-page电泳跑胶，出现目地条带，且看起来表达量还可以。上清10ml用PBS透析后上Ni柱，跑胶，结果穿透液，洗涤液（咪唑10mM）和洗脱液（咪唑250mM）均没有目地蛋白，后来在样品和洗涤，洗脱液中加了4M尿素，跑胶发现在穿透液，洗涤液中隐约出现了目地蛋白条带，但量很低，这样应该怎么调整纯化条件呢？ 发自小木虫Android客户端 |
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