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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酵母重组蛋白纯化问题
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MeiPD

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酵母重组蛋白纯化问题
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用酵母做重组，表达融合蛋白约9.7K，属于分泌型表达，含His-tag，取上清10倍浓缩后进行Tri-sds-page电泳跑胶，出现目地条带，且看起来表达量还可以。上清10ml用PBS透析后上Ni柱，跑胶，结果穿透液，洗涤液（咪唑10mM）和洗脱液（咪唑250mM）均没有目地蛋白，后来在样品和洗涤，洗脱液中加了4M尿素，跑胶发现在穿透液，洗涤液中隐约出现了目地蛋白条带，但量很低，这样应该怎么调整纯化条件呢？

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1楼 2017-12-18 19:27:56
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轩辕佑德2楼
2017-12-18 19:28   回复  
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润色论文3楼
2017-12-18 19:29   回复  
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4182362854楼
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chibang12205楼
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emu_yu6楼
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bush2867楼
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pandongzi8楼
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南山桃源9楼
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cosmos79610楼
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youku_zhc111楼
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我乃小白12楼
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YX要努力13楼
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yingluo14楼
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cqzzc15楼
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tangzl16楼
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swedenchen17楼
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yaoweilin18楼
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黄河龙成19楼
2017-12-18 19:40   回复  
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黄河龙成20楼
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liuxun500021楼
2017-12-18 19:40   回复  
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