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蛋白印迹中跑电泳样品分层，在分离胶上出现两个条带
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蛋白印迹的具体步骤如下： 一、提取肺组织的全蛋白 50mg组织+0.7mlbuffer(配置好的)，离心吸取上清液，按1：4变性，上样缓冲液1，样品4。97摄氏度，变性5min。 二、蛋白印迹测肺组织中的beta actin 12%分离胶：37摄氏度烘箱中放置30min，南昌冬天温度太低了； 5%浓缩胶：与分离胶一样处理。 上样量为20ul， 电泳条件为：70v/30min,120v/1h。 跑电泳的时候发现样品条带分层了，昨天也用该样品测了没有出现分层的现象。 今天做的实验改变的有30%丙烯酰胺（新配置的），和电泳条件，昨天是80v/40min,120v/1h，因为结果也不好，感觉电压过高，所以今天降低了电压。 不知道是不是自己丙烯酰胺没有配置好。  1217WB跑电泳分层.jpg |
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