24小时热门版块排行榜    

查看: 1206  |  回复: 3

LJLJZS

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液破碎,破碎完自己析出絮状沉淀是怎么回事?

我表达的蛋白是在包涵体,要破碎菌液取包涵体,用的缓冲液是实验室自己配的,具体有什么我也不太清楚,大概有tris盐酸,溶菌酶,EDTA…破碎的时候没加pmsf,实验室的人说EDTA和pmsf作用差不多不用加。600ml菌液,离心收集菌,再用30ml这个缓冲液重悬破碎,一次破15ml,破碎8s,停10s,差不多半个小时吧,破碎完过了一会就自己析出很多絮状沉淀,液体变得很清亮。这是怎么回事,我的蛋白还能用么?

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

包涵体蛋白大部分都是脂溶性的,很难溶解,我的理解应该是包涵体蛋白析出吧

发自小木虫Android客户端
2楼2017-12-16 06:53:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr.XXX

新虫 (正式写手)

你可以再离心一下,对上清液和沉淀分别做下鉴定

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-12-17 09:26:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skull123

木虫 (正式写手)

包涵体在超声波破碎后是会沉淀下来的,溶解不了,而且超声波破碎没有高压均质机弄的小,高压均质机重新碎的也会沉淀,但是沉淀慢一些。
4楼2017-12-17 13:11:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LJLJZS 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-16 10/500 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭! 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +6 困于星晨 2026-03-17 6/300 2026-03-18 10:21 by kkcoco25
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么! 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy! 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
信息提示
请填处理意见