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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 求助，分光光度计测蛋白质含量与凯氏定氮法测得的结果相差太多
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妲己?

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助，分光光度计测蛋白质含量与凯氏定氮法测得的结果相差太多 已有1人参与

提取出来的蛋白，用凯氏定氮法测完，又用A280-A260测一遍，结果差好多，然后又用考马斯亮蓝法测，结果还是一样，与凯氏定氮法差了20多倍。是什么原因导致的呢？

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真相只有一个~~
1楼 2017-12-11 13:42:21
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为梦封情

金虫 (著名写手)

救世主
请问你提取的是什么蛋白？

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我要践踏一切！
2楼2017-12-12 09:22:49
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卡拉果胶

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
A280-A260的比值不是用来做纯度判断的么？
考马斯亮蓝法应该比较可靠，凯氏定氮法，测总氮，不能排除蛋白中有其他含氮杂质
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3楼2017-12-12 11:08:50
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妲己?

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 为梦封情 at 2017-12-12 09:22:49
请问你提取的是什么蛋白？

鹿皮蛋白

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真相只有一个~~
4楼2017-12-12 16:28:59
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妲己?

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 卡拉果胶 at 2017-12-12 11:08:50
A280-A260的比值不是用来做纯度判断的么？
考马斯亮蓝法应该比较可靠，凯氏定氮法，测总氮，不能排除蛋白中有其他含氮杂质

A260和280这个根据计算公式算的，是为了排除核酸的干扰，但是为什么考马斯亮蓝法测得值会和凯氏定氮法测的出入这么大呢，分子量太小会影响结果吗？

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真相只有一个~~
5楼2017-12-12 16:32:22
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