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妲己?

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助,分光光度计测蛋白质含量与凯氏定氮法测得的结果相差太多 已有1人参与

提取出来的蛋白,用凯氏定氮法测完,又用A280-A260测一遍,结果差好多,然后又用考马斯亮蓝法测,结果还是一样,与凯氏定氮法差了20多倍。是什么原因导致的呢?

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真相只有一个~~
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为梦封情

金虫 (著名写手)

救世主

请问你提取的是什么蛋白?

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我要践踏一切!
2楼2017-12-12 09:22:49
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卡拉果胶

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
A280-A260的比值不是用来做纯度判断的么?
考马斯亮蓝法应该比较可靠,凯氏定氮法,测总氮,不能排除蛋白中有其他含氮杂质
3楼2017-12-12 11:08:50
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妲己?

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 为梦封情 at 2017-12-12 09:22:49
请问你提取的是什么蛋白?

鹿皮蛋白

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真相只有一个~~
4楼2017-12-12 16:28:59
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妲己?

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 卡拉果胶 at 2017-12-12 11:08:50
A280-A260的比值不是用来做纯度判断的么?
考马斯亮蓝法应该比较可靠,凯氏定氮法,测总氮,不能排除蛋白中有其他含氮杂质

A260和280这个根据计算公式算的,是为了排除核酸的干扰,但是为什么考马斯亮蓝法测得值会和凯氏定氮法测的出入这么大呢,分子量太小会影响结果吗?

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真相只有一个~~
5楼2017-12-12 16:32:22
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