应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 散金币，同源臂设计
81/1返回列表
查看: 1029  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

千里寻万里路

新虫 (初入文坛)

[交流] 散金币，同源臂设计

在原核生物中做基因敲除，同源臂怎么设计？请大家支招。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2017-12-09 21:30:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

singlestarss

银虫 (正式写手)
★
千里寻万里路: 金币+1 2017-12-11 21:00:40
你用什么方法？

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
2楼2017-12-10 05:48:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

千里寻万里路

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by singlestarss at 2017-12-10 05:48:17
你用什么方法？

同源重组  PKD46质粒提供重组酶
赞一下 回复此楼
3楼2017-12-11 21:00:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

千里寻万里路

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by singlestarss at 2017-12-10 05:48:17
你用什么方法？

请问你知道怎样设计同源臂吗？ 回答有金币送哦
赞一下 回复此楼
4楼2017-12-11 21:01:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莫落

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为了增加重组的概率，同源臂当然是长一点好，一般500bp还是挺好使的。
同源臂和抗性片段通过OverlapPCR连接。为了降低出现假阳性概率，最好用DpnI对打靶片段就行消化。最后打靶片段的浓度最好在几百ng/uL的样子。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-12-12 10:20:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

arthrospira

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
以需敲除基因上、下游约20个碱基对序列的互补序列为同源臂。
赞一下 回复此楼
8楼2017-12-12 10:23:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
gift5楼
2017-12-12 01:04   回复  
lyf18506楼
2017-12-12 09:52   回复  
祝福 祝福
相关版块跳转 我要订阅楼主 千里寻万里路 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭