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汕头大学海洋科学接受调剂
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一院微风

新虫 (初入文坛)

[求助] 杂菌的分离 已有1人参与

小白一名。我拿到的菌液,在液面和管壁交界处长了杂菌,请问我怎么分离纯化,得到我想要的菌?十分感谢!

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贺玉广

新虫 (正式写手)

稀释涂板或划线,直至有单一菌落,真菌的话培养基中可以加些抗生素

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2楼2017-12-06 23:39:31
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yuyan9179

铁虫 (初入文坛)

稀释涂布然后挑单菌落,如果你的菌没有菌落形态上的特征让你区分就提DNA测16S吧。
Mysuccessjustevolvedfromworkinghardatthebusinessathandeachday
3楼2017-12-07 09:19:02
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1, 交界处的菌落,有可能是菌苔,也就是细菌在液体表面生长的菌落,这个不一定是杂菌,请仔细思量下。
2,分离纯化,最基本的操作,就是平板的分区划线。
3,有条件可以在分区前做一些功能性的筛选工作,比如取N个相同的培养基试管,分别加入各种抑制剂,厌氧,需氧,微需氧,pH值梯度, 抗生素,其他的抑制剂等,你可以根据你培养的条件进行适当的筛选。这个可以认为是前增菌过程。
4,你可以根据预实验的结果,分别采用国标方法进行鉴定,推荐使用国标或者生化分析的方法进行鉴定。当然,可以选择其他的方法,比如微生物质谱,这块我也在做,比较快,但是有些菌株对于前处理要求很高,比较难,还在摸索阶段。16s,这块的话,比较粗,通过测序结果blast后,有可能出来的结果会跟培养法有冲突,只能作为参考。高通量测序,这块是基于16s和特征基因的测序法,相对来说,比16s好一些,因为参考基因不仅仅是16s。你也可以通过PCR的方法,P一些特征性的毒力基因来鉴定,也是可以做的。

欢迎批评指正,欢迎交流!
4楼2017-12-07 10:18:51
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